典型文献
Streptomyces aidingensis CGMCC4.5739中环二肽氧化酶DmtD3_E3的体外生化功能
文献摘要:
[背景]环二肽合酶(cyclodipeptide synthase,CDPS)途径中新颖后修饰酶的挖掘对获得结构新颖活性良好的二酮哌嗪类化合物具有重要意义.前期研究中发现来源于Streptomyces aidingensis CGMCC 4.5739的环二肽合酶基因簇dmt3中dmtA3B3C3可编码二酮哌嗪-萜类化合物drimentines(DMTs),推测其下游环二肽氧化酶基因dmtD3_E3也参与了 DMTs的生物合成,但其功能一直未鉴定.[目的]对S.aidingensis CGMCC 4.5739中环二肽合酶基因簇dmt3内的环二肽氧化酶DmtD3_E3的功能进行表征,为增加二酮哌嗪类化合物结构多样性提供功能元件.[方法]从S.aidingensis CGMCC 4.5739的基因组中克隆环二肽氧化酶基因dmtD3_E3,构建重组表达质粒pWLI209,并在大肠杆菌BL21(DE3)中可溶性表达.通过建立体外酶促反应,运用液质联用(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)和核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)等方法确定催化产物结构.[结果]环二肽氧化酶DmtD3_E3可催化环二肽cyclo-(L-Trp-L-Leu)(cWL)的 C14-C17 位氧化脱氢形成 cyclo-(L-Trp-L-△Leu)(cW△L).此外DmtD3_E3 还可以催化环二肽 cyclo-(L-Trp-L-Ala)(cWA)的 C10-C11 位脱氢生成 cyclo-(L-Trp-L-△A1a)(c△WA),具有底物宽泛性.[结论]本研究通过对环二肽合酶生物合成途径中新颖环二肽氧化酶的挖掘和表征,为后续通过组合生物合成及合成生物学手段生成"非天然"二酮哌嗪类化合物衍生物奠定了基础.
文献关键词:
环二肽氧化酶;StreptomycesaidingensisCGMCC4.5739;二酮哌嗪类化合物;环二肽合酶生物合成途径
中图分类号:
作者姓名:
姜玥辰;姚婷婷;袁伟程;李文利
作者机构:
中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室,山东青岛266003
文献出处:
引用格式:
[1]姜玥辰;姚婷婷;袁伟程;李文利-.Streptomyces aidingensis CGMCC4.5739中环二肽氧化酶DmtD3_E3的体外生化功能)[J].微生物学通报,2022(11):4608-4616
A类:
aidingensis,CGMCC4,环二肽氧化酶,DmtD3,cyclodipeptide,二酮哌嗪类化合物,dmt3,dmtA3B3C3,drimentines,DMTs,dmtD3,pWLI209,cWL,cW,cWA,环二肽合酶生物合成途径,StreptomycesaidingensisCGMCC4
B类:
中环,外生化,生化功能,synthase,CDPS,后修饰,前期研究,酶基因,基因簇,可编,萜类化合物,结构多样性,重组表达,质粒,大肠杆菌,BL21,DE3,可溶性表达,体外酶促反应,液质联用,high,performance,liquid,chromatography,mass,spectrometry,HPLC,nuclear,magnetic,resonance,NMR,催化产物,Trp,Leu,C14,C17,氧化脱氢,Ala,C10,C11,A1a,有底,底物,宽泛,合成生物学,衍生物
AB值:
0.17996
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