典型文献
Streptomyces coelicolor A3(2)中新颖Ⅰ型羊毛硫肽的挖掘及异源表达
文献摘要：
[目的 ]Ⅰ型羊毛硫肽通常具有广泛的生物活性,且抑菌机制独特,较少产生耐药性,因而在临床上具有很好的应用前景.本文对Streptomyces coelicolor A3(2)基因组上2个新颖的Ⅰ型羊毛硫肽生物合成基因簇进行研究,以实现目标羊毛硫肽的表达.[方法]首先,通过antiSMASH分析S.coelicolor A3(2)基因组序列,挖掘羊毛硫肽生物合成基因簇,使用BLAST进行基因功能注释,选择可能参与生物合成过程的基因;然后利用基因组装技术构建异源表达质粒,通过接合转移在链霉菌底盘细胞中进行异源表达;最后对发酵产物进行高效液相色谱、质谱及生物活性检测.[结果]通过添加启动子元件重构S.coelicolor A3(2)上基因簇3(8.9 kb)和基因簇24(9.0 kb),得到pYES-ColE1-SCO-cluster3 和 pYES-ColEl-SCO-cluster24.pYES-ColE1-SCO-cluster3 在底盘细胞Streptomyces coelicolor M1152 和 Streptomyces sp.A14 中成功表达,得到潜在目标化合物 coelin 3;pYES-ColE1-SCO-cluster24在底盘细胞Streptomyces sp.ZM13中成功表达,得到潜在目标化合物coelin 24.其中 coelin 3 对 Bacillus subtilis 168 和 Escherichia coli ATCC 25922 具有抑制作用,并且抑菌圈均达到28mm.[结论]本研究成功使用启动子激活和异源表达策略实现了 coelin3和coelin24的表达和活性测试,为后续新颖的羊毛硫肽结构解析和作用机制研究奠定了基础.
文献关键词：
羊毛硫肽;链霉菌;异源表达
中图分类号：
作者姓名：
钱润泽;罗云孜
作者机构：
天津大学化工学院,合成生物学前沿科学中心,系统生物工程教育部重点实验室,天津300072
文献出处：
引用格式：
[1]钱润泽;罗云孜-.Streptomyces coelicolor A3(2)中新颖Ⅰ型羊毛硫肽的挖掘及异源表达)[J].微生物学报,2022(10):3899-3912
A类：
coelicolor,羊毛硫肽,pYES,ColE1,cluster3,ColEl,cluster24,M1152,coelin,ZM13,coelin3,coelin24
B类：
Streptomyces,A3,异源表达,抑菌机制,少产,耐药性,生物合成基因簇,实现目标,antiSMASH,基因组序列,BLAST,基因功能注释,合成过程,基因组装,组装技术,技术构建,质粒,接合转移,链霉菌,底盘细胞,发酵产物,生物活性检测,启动子,kb,SCO,sp,A14,目标化,Bacillus,subtilis,Escherichia,coli,ATCC,抑菌圈,28mm,表达策略,肽结构,结构解析
AB值：
0.229208
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
