猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种以水样腹泻、呕吐和脱水为主要特征的猪急性肠道传染病.PEDV细胞适应性毒株与其他毒株之间的区别主要发生在ORF3基因,该基因的缺失可作为病毒适应细胞的标志.本实验室前期分离获得了1株广西自然截短的PEDV毒株17GXCZ-1ORF3d,为更好地鉴别不同类型毒株,本研究建立了可鉴别PEDV ORF3基因自然截短株的常规PCR以及双重荧光PCR检测方法.结果显示,2种方法均能鉴别PEDV ORF3基因截短株,且特异性好.另外,双重荧光PCR的检测下限为100.59PFU/mL,比所建立的常规PCR方法灵敏100倍,敏感性高.对收集的221份临床样品进行初步应用,常规PCR检出126份阳性样品,其中鉴别出14份ORF3基因截短株单独感染样品,而双重荧光PCR检出阳性样品145份,同样鉴别出14份ORF3基因截短株单独感染样品.本研究建立的2种PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,对PEDV ORF3基因截短株的快速鉴别与检测具有重要意义.

猪流行性腹泻病毒;双重荧光PCR;ORF3基因;自然截短毒株;鉴别诊断

广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁530005

[1]杜琛;廖梦娟;曾德平;唐桂浩;闭云贵;柏家果;陆颖;速雪丽;陈樱;韦祖樟;黄伟坚;欧阳康-.鉴别猪流行性腹泻病毒ORF3基因截短株常规PCR及双重荧光PCR方法的建立及初步应用)[J].中国兽医学报,2022(09):1737-1743

17GXCZ,1ORF3d,59PFU,自然截短毒株

猪流行性腹泻病毒,初步应用,PEDV,水样,肠道传染病,检测下限,独感,法特,灵敏度高,快速鉴别,鉴别诊断

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