典型文献
TRAF6通过内源性凋亡通路促进卡介苗诱导的巨噬细胞凋亡
文献摘要：
目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对卡介苗(BCG)诱导巨噬细胞凋亡的调控作用.方法 Q-PCR检测活动性结核患者外周血中TRAF6的表达后利用不同感染复数的BCG感染RAW264.7细胞,在感染的不同时间通过Q-PCR和Western blot检测巨噬细胞中Caspase 3和TRAF6的表达.时间梯度试验处理组分为5组:对照组(未感染,C)、BCG感染6 h组、12 h组、18 h组和24 h组;感染复数试验处理组分为5组:对照组(未感染,C)、5 MOI组、10 MOI组、15 MOI组和20 MOI组.随后,通过小干扰RNA技术敲减RAW264.7细胞中TRAF6的表达,并结合BCG感染建立TRAF6敲减模型.TRAF6敲减实验分为4组:阴性对照组(NC)、BCG单独感染组(BCG)、TRAF6小干扰RNA单独处理组(siRNA)和TRAF6小干扰RNA与BCG共处理组(siRNA+BCG).利用平板涂布法检测巨噬细胞菌载量变化.通过流式细胞术检测巨噬细胞凋亡率和线粒体膜电位变化.利用Western blot检测TRAF6、Caspase 3、PARP、Bcl-2,BAX的表达.使用免疫荧光技术检测TRAF6与Caspase 3的表达.结果 与健康人群相比,活动性结核患者外周血中TRAF6高表达(P<0.001).BCG感染显著上调RAW264.7中TRAF6与Caspase 3的表达,且当感染时间为18 h(P=0.03,P=0.04),感染复数为15时二者表达量最高(P<0.001,P<0.001).敲减TRAF6上调BCG感染的巨噬细胞内的菌载量(P=0.05).与BCG单独处理组相比,敲减TRAF6显著抑制BCG感染的巨噬细胞凋亡率(P<0.001),并显著下调Caspase 3(P=0.002)和PARP的表达(P<0.001).同时,BCG感染RAW264.7细胞的线粒体膜电位上升(P<0.001),而敲减TRAF6抑制BCG感染的巨噬细胞线粒体膜电位(P<0.001).敲减TRAF6显著下调BCG感染巨噬细胞中BAX表达(P=0.005)的同时上调Bcl-2的表达(P=0.04).结论 TRAF6通过内源性凋亡通路促进BCG感染的巨噬细胞凋亡.
文献关键词：
TRAF6;卡介苗;巨噬细胞;细胞凋亡;内源性细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
马沁梅;刘莉;于嘉霖;宫照乾;王晓平;吴晓玲;邓光存
作者机构：
西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏 银川 750021;宁夏大学生命科学学院,宁夏 银川750021;宁夏回族自治区第四人民医院,宁夏 银川 750021
文献出处：
引用格式：
[1]马沁梅;刘莉;于嘉霖;宫照乾;王晓平;吴晓玲;邓光存-.TRAF6通过内源性凋亡通路促进卡介苗诱导的巨噬细胞凋亡)[J].南方医科大学学报,2022(09):1279-1287
A类：
siRNA+BCG
B类：
TRAF6,凋亡通路,卡介苗,巨噬细胞凋亡,相关因子,活动性结核,结核患者,复数,RAW264,blot,Caspase,时间梯度,梯度试验,未感染,MOI,小干扰,敲减,NC,独感,独处,共处理,涂布法,载量,过流,流式细胞术,细胞凋亡率,线粒体膜电位,PARP,Bcl,BAX,免疫荧光技术,健康人群,内源性细胞凋亡
AB值：
0.179685
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