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沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响
文献摘要：
目的 探讨沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用数据库分析BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中的表达情况及后评估价值,免疫组织化学技术检测三阴性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和癌旁组织中BLM DNA解旋酶表达,Western blot检测MCF-10A细胞、MCF-7细胞、MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶蛋白表达水平;合成siRNA序列沉默MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶基因的表达,选取沉默效率最高的siRNA-BLM 3序列构建shRNA干扰载体慢病毒;将慢病毒感染MDA-MB-468细胞分为shRNA-NC组和shRNA-BLM组,MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,单细胞凝胶电泳技术检测与DNA损伤相关的细胞尾部DNA含量,免疫细胞化学检测DNA损伤标志物γ-H2AX表达情况,Western blot检测凋亡相关蛋白及DNA损伤修复蛋白表达情况.结果 生物信息学分析显示BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中高表达,且与乳腺癌患者不良预后密切相关;三阴性乳腺癌组织BLM DNA解旋酶表达水平高于乳腺纤维腺瘤和癌旁组织(P<0.001);与MCF-10A细胞、MCF-7细胞比较,MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶蛋白表达水平升高(P<0.01);与未转染组比较,siRNA-BLM 3组BLM DNA解旋酶蛋白表达下调(P<0.05);与shRNA-NC组比较,shRNA-BLM组细胞增殖能力被抑制、凋亡率升高、尾部DNA含量增加、γ-H2AX阳性细胞比例升高(P<0.01)、凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8表达上调,Bcl-2及DNA损伤修复蛋白BRCA1、Rad51、BLM表达下调(P<0.05).结论 沉默BLM DNA解旋酶基因表达抑制三阴性乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,凋亡机制可能与细胞DNA损伤增加,DNA损伤修复相关蛋白受抑制有关.
文献关键词：
乳腺肿瘤;细胞增殖;细胞凋亡;BLM DNA解旋酶基因;RNA干扰
中图分类号：
作者姓名：
黄亚兰;张望明;刘小花;余晓静;安丽君;吴介恒;杨留启;刘杰麟
作者机构：
贵州医科大学 基础医学院免疫学教研室, 贵州 贵阳 550025;贵州医科大学 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室, 贵州贵阳 550014
文献出处：
引用格式：
[1]黄亚兰;张望明;刘小花;余晓静;安丽君;吴介恒;杨留启;刘杰麟-.沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响)[J].贵州医科大学学报,2022(08):869-878
A类：
B类：
BLM,解旋酶,MB,增殖和凋亡,数据库分析,癌组织,后评估,评估价值,免疫组织化学技术,乳腺纤维腺瘤,癌旁组织,blot,MCF,10A,蛋白表达水平,siRNA,shRNA,干扰载体,慢病毒感染,NC,MTT,克隆形成,实验检测,细胞增殖能力,流式细胞术,单细胞凝胶电泳,电泳技术,尾部,免疫细胞化学,化学检测,H2AX,凋亡相关蛋白,白及,损伤修复,生物信息学分析,乳腺癌患者,不良预后,转染,凋亡率,阳性细胞,Bax,cleaved,Caspase,Bcl,BRCA1,Rad51,酶基因表达,表达抑制,三阴性乳腺癌细胞,复相,乳腺肿瘤
AB值：
0.208065
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