目的:探讨转录激活因子6(ATF6)/CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路对牛分枝杆菌减毒株(卡介苗,BCG)感染的THP-1细胞焦亡的调控作用.方法:在感染复数为10:1的BCG感染THP-1细胞2、6、12、24和48 h基础上,设置si-NC组、si-NC+BCG组、si-ATF6+BCG组及si-CHOP+BCG组.si-NC组转染干扰阴性对照24 h后正常培养;si-NC+BCG组先转染阴性对照24 h后以感染复数为10:1的BCG感染24 h;si-ATF6+BCG组和si-CHOP+BCG组分别转染si-ATF6和si-CHOP 24 h后再用感染复数为10:1的BCG感染24 h.采用Western blot检测cleaved ATF6、CHOP、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、pro-caspase-1、caspase-1 p20、含cas-pase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1βp17、IL-18 p22及消皮素D-N端片段(GSDMD-N)蛋白表达;采用免疫荧光检测GSDMD蛋白表达;采用CCK-8法检测细胞活力.结果:Western blot结果显示,BCG感染THP-1细胞后,cleaved ATF6和CHOP蛋白的表达随感染时间延长逐渐升高,48 h达到最高,而GSDMD-N蛋白在24 h表达最高(P<0.01).与si-NC组相比,si-NC+BCG组的cleaved ATF6、CHOP、NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1 p20、ASC、IL-1βp17、IL-18 p22及GSDMD-N蛋白表达显著上调(P<0.01),细胞内GSDMD含量显著增加(P<0.01),细胞活力显著下降(P<0.01);与si-NC+BCG组相比,si-ATF6+BCG组上述蛋白表达显著下调(P<0.01),细胞内GSDMD含量显著下降(P<0.01),细胞活力显著上升(P<0.01);与si-NC+BCG组相比,si-CHOP+BCG组上述蛋白表达显著下调(P<0.01),细胞内GSDMD含量显著下降(P<0.01),细胞活力显著上升(P<0.01).结论:ATF6/CHOP信号通路对BCG感染的THP-1细胞焦亡具有调控作用.

THP-1细胞;卡介苗;ATF6/CHOP信号通路;细胞焦亡

马伯利;刘悦阳;聂雪伊;李梦媛;杨易;徐金瑞

宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川750021

中国病理生理杂志

[1]马伯利;刘悦阳;聂雪伊;李梦媛;杨易;徐金瑞-.ATF6/CHOP信号通路对减毒牛结核分枝杆菌感染的THP-1细胞焦亡的调控作用)[J].中国病理生理杂志,2022(12):2183-2190

减毒牛结核分枝杆菌,NC+BCG,ATF6+BCG,CHOP+BCG

结核分枝杆菌感染,THP,细胞焦亡,转录激活因子,CCAAT,增强子,结合蛋白,同源蛋白,牛分枝杆菌,减毒株,卡介苗,复数,si,转染,blot,cleaved,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白,NLRP3,pro,caspase,p20,募集,集结,凋亡相关斑点样蛋白,ASC,p17,p22,消皮素,GSDMD,免疫荧光检测,CCK,细胞活力,随感

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