目的 探究葛根素(PR)对角质形成细胞生长因子(KGF)诱导的HaCaT细胞银屑病模型的影响及其作用机制.方法 使用40 ng·mL-1的KGF处理细胞0、12、24、48、72 h后使用细胞计数-8(CCK-8)实验检测细胞光密度(OD)值筛选最佳作用时间.然后将细胞分为Control(正常培养)、KGF(KGF)、KGF+PR-L(KGF+3 mg·mL-1 PR处理)、KGF+PR-H(KGF+6 mg·mL-1 PR处理)、KGF+PR-H+pcDNA-NC(KGF+6 mg·mL-1 PR处理,并转染pcDNA-NC)、KGF+PR-H+pcDNA-NLRP3(KGF+6 mg·mL-1 PR处理,并转染pcD-NA-NLRP3)组.用CCK-8检测细胞增殖能力,用平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,用流式细胞术检测细胞周期进程,用蛋白质印迹(Western blot)法检测Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、周期素依赖性激酶2(CDK2)蛋白表达情况,用酶联免疫吸附(EILSA)实验检测各组细胞白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-17(IL-17)炎症因子表达情况.结果 Control、KGF、KGF+PR-L、KGF+PR-H、KGF+PR-H+pcDNA-NC、KGF+PR-H+pcDNA-NLRP3组细胞存活率分别为(100.00±2.79)％,(157.95±5.14)％,(137.90±4.85)％,(114.50±9.30)％,(113.94±9.09)％和(141.91±5.72)％;克隆数目分别为(205.50±14.84),(341.83±21.37),(297.17±20.05),(237.50±11.07),(234.17±16.06)和(307.67±15.16)个;G0/G1期细胞比例分别为(55.25±2.02)％,(51.00±2.04)％,(57.95±2.45)％,(71.50±3.23)％,(70.11±2.77)％和(51.98±2.59)％;IL-17含量分别为(58.80±5.35),(209.85±15.83),(140.34±10.26),(86.69±3.35),(86.65±3.04)和(193.45±5.25)pg·mL-1.以上指标,Control与KGF组比较,KGF+PR-L、KGF+PR-H组与KGF组比较,KGF+PR-L与KGF+PR-H组比较,KGF+PR-H+pcDNA-NC组与KGF+PR-H+pcDNA-NLRP3组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 葛根素可通过抑制NLRP3的表达,抑制HaCaT细胞增殖能力和炎症反应,并诱导细胞周期阻滞.

葛根素;银屑病;HaCaT细胞;炎症反应;Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3

曹璨;孙颖;穆震;张超;吴嘉惠;韦方丽

山东第一医科大学第二附属医院皮肤科,山东泰安271000

中国临床药理学杂志

[1]曹璨;孙颖;穆震;张超;吴嘉惠;韦方丽-.葛根素对银屑病细胞模型HaCaT细胞增殖和炎症因子影响)[J].中国临床药理学杂志,2022(24):2999-3003

角质形成细胞生长因子,KGF+PR,KGF+3,KGF+6,EILSA

葛根素,银屑病,细胞模型,HaCaT,对角,CCK,实验检测,光密度,OD,佳作,作用时间,Control,H+pcDNA,NC,转染,NLRP3,细胞增殖能力,平板克隆实验,细胞克隆形成,克隆形成能力,流式细胞术,蛋白质印迹,blot,Nod,样受体,体热,蛋白结构域,增殖细胞核抗原,PCNA,周期素,D1,Cyclin,CDK2,酶联免疫吸附,转化生长因子,TGF,细胞存活率,G0,G1,pg,细胞周期阻滞

0.178457