典型文献
基于Cre/loxP系统的睾丸组织特异性敲除Elovl4基因小鼠模型的构建及敲除效率检测
文献摘要:
极长链多不饱和脂肪酸(very long chain polyunsaturated fatty acids,VLC-PUFAs)是哺乳动物视网膜、睾丸等极少数组织中特有的脂肪酸,其生物合成的关键酶为极长链脂肪酸延长酶4(very long chain fatty acid elongase 4,Elovl4).建立组织特异性敲除Elovl4基因的动物模型有利于深入研究VLC-PUFAs的生物学功能,因此,本研究基于Cre/loxP系统,先分别构建了 Stra8-Cre小鼠和Elovl4 floxed小鼠,通过杂交获得(Elovl4[flox/+],Stra8-Cre)杂合子基因敲除小鼠,再选择雌鼠与Elovl4 floxed纯合子雄鼠即Elovl4[flox/flox]雄鼠杂交,通过基因型鉴定筛选获得(Elovl4[flox/flox],Stra8-Cre)纯合子小鼠.利用 RT-PCR、qRT-PCR、Western blotting、免疫组化和免疫荧光检测Elovl4在睾丸组织中的敲除效率,结果表明,无论是杂合子还是纯合子基因敲除小鼠,其睾丸组织中Elovl4的表达在mRNA及蛋白水平显著下调,但其他组织未受影响.本研究成功构建了睾丸组织特异性敲除Elovl4基因小鼠,为后续研究VLC-PUFAs对雄性小鼠生殖功能的影响及相关分子机制提供可靠的动物模型.
文献关键词:
Cre/loxP;睾丸;Elovl4;Stra8-Cre;特异性敲除
中图分类号:
作者姓名:
杨仕赛;赵瑄;王雨虹;郑红梅;甘婷;朱贵明
作者机构:
贵州医科大学基础医学院,贵州贵阳5500252;贵州医科大学生物与工程学院生物与医学工程重点实验室,贵州贵阳550025
文献出处:
引用格式:
[1]杨仕赛;赵瑄;王雨虹;郑红梅;甘婷;朱贵明-.基于Cre/loxP系统的睾丸组织特异性敲除Elovl4基因小鼠模型的构建及敲除效率检测)[J].生物工程学报,2022(08):2912-2927
A类:
Elovl4,floxed
B类:
Cre,loxP,睾丸组织,组织特异性,特异性敲除,小鼠模型,除效率,效率检测,多不饱和脂肪酸,very,chain,polyunsaturated,fatty,acids,VLC,PUFAs,哺乳动物,视网膜,极少数,数组,生物合成,关键酶,长链脂肪酸,elongase,动物模型,生物学功能,Stra8,杂合子,基因敲除小鼠,再选,雌鼠,纯合子,雄鼠,基因型鉴定,qRT,blotting,免疫组化,免疫荧光检测,他组织,雄性小鼠,生殖功能
AB值:
0.240191
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