烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)具备多种生物学功能,对心脑疾病、老年退行性疾病、神经退行性疾病、抗衰老等具有治疗作用.经NMN处理后的骨骼肌对衰老相关的转录变化有显著的预防作用,但NMN对骨骼肌增殖分化有何作用尚不明确.为深入了解NMN对细胞成肌分化的影响、丰富肌肉生长发育的机制,本研究以小鼠(Mus musculus)成肌细胞(mouse myoblasts)C2C12为模型,将不同浓度的NMN(0,0.1,1和2μg/mL)应用于2％马血清(horse serum,HS)诱导分化的C2C12.采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测NMN处理后C2C12细胞的活力;通过2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(2',7'-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)和四氯四乙基苯并咪唑碳菁碘(5,5',6,6'-tetrechloro-1,1',3,3'-tetraethyl benzimidazol carbocyanine iodide,JC-1)两种荧光探针,分别对细胞进行染色,检测NMN对C2C12细胞线粒体膜电位和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的影响;利用Western blot及免疫荧光技术检测肌细胞分化标记因子肌生成素(myogenin,MyoG)、肌分化因子1(myogenic differentiation 1,MyoD1)表达和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MYH)的蛋白表达水平.结果显示,0、0.1、1和2μg/mL的NMN对C2C12细胞没有毒性作用,并且一定浓度的NMN在一定时间内可以促进细胞活力,提高线粒体膜电位,上调成肌分化相关蛋白MyoG、MyoD1和MYH的表达.上述研究结果表明,一定浓度的NMN在一定时间内可以促进C2C12细胞成肌分化.本研究丰富了NMN的生理作用,为后续NMN在畜牧产业的应用提供新的参考基础.

烟酰胺单核苷酸(NMN);C2C12细胞;成肌分化;肌肉特异性基因

浙江农林大学动物科技学院/动物医学院,临安311300

[1]沈龙仙;王丽婷;汪涵;杨松柏;李向臣;赵阿勇;周晓龙-.烟酰胺单核苷酸(NMN)对小鼠C2C12细胞成肌分化的影响)[J].农业生物技术学报,2022(04):695-703

dichlorodi,hydrofluorescein,tetrechloro,benzimidazol,carbocyanine,肌生成素,肌肉特异性基因

烟酰胺单核苷酸,NMN,C2C12,成肌分化,nicotinamide,mononucleotide,生物学功能,心脑,脑疾病,老年退行性疾病,神经退行性疾病,抗衰老,有治,治疗作用,骨骼肌,老相,预防作用,增殖分化,肌肉生长发育,Mus,musculus,成肌细胞,mouse,myoblasts,horse,serum,HS,诱导分化,CCK,Cell,Counting,Kit,二氯,乙酸盐,diacetate,DCFH,DA,四氯,四乙,乙基,苯并咪唑,tetraethyl,iodide,JC,荧光探针,线粒体膜电位,reactive,oxygen,species,ROS,blot,免疫荧光技术,细胞分化,myogenin,MyoG,myogenic,differentiation,MyoD1,肌球蛋白重链,myosin,heavy,chain,MYH,蛋白表达水平,有毒,毒性作用,细胞活力,高线,调成,生理作用,畜牧产业

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