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典型文献
斑马鱼gpr112a基因敲除品系的构建
文献摘要:
GPR112蛋白作为黏附类G蛋白偶联受体(aGPCRs)家族的一员,由GPR112基因编码.它含有7个跨膜结构域,与G蛋白相互作用行使其功能.斑马鱼作为研究脊椎动物发育的重要模式生物,其基因组中含有GPR112的同源基因gpr112a,且在幼鱼和成鱼中均有表达.为了研究GPR112在脊椎动物生存和发育中的作用,利用CRISPR-Cas9技术构建了gpr112a基因敲除斑马鱼品系.首先,合成用于靶向gpr112a基因第二外显子的一对sgRNAs,经显微注射得到F0代嵌合体斑马鱼.然后,对嵌合体与野生型斑马鱼杂交所得的F1代斑马鱼进行基因型鉴定,筛选gpr112a突变杂合子,并对其gpr112a突变等位基因进行Sanger测序,以确定gpr112a基因敲除品系的建立.之后,gpr112a突变杂合子斑马鱼自交,获得gpr112a纯合子突变斑马鱼.经显微成像并观察发现,受精后7 dpf的gpr112a突变纯合子斑马鱼并没有出现与野生型差异明显的表型,这可能是斑马鱼机体的代偿机制所致.此研究为探究GPR112基因在脊椎动物生存和发育中的作用开辟了道路.
文献关键词:
斑马鱼;gpr112a;CRISPR-Cas9;基因敲除;代偿机制
作者姓名:
孙鲁宁;杨博宇;刘玲;朱俊伟;杨添乐;彭政;郑澜;谢华平
作者机构:
湖南师范大学动物肠道功能调控湖南省重点实验室,长沙 410081;湖南师范大学动物营养与人体健康实验室,长沙 410081;湖南师范大学体适能与运动康复湖南省重点实验室,长沙 410081;湖南师范大学淡水鱼类发育生物学国家重点实验室,长沙 410081
文献出处:
引用格式:
[1]孙鲁宁;杨博宇;刘玲;朱俊伟;杨添乐;彭政;郑澜;谢华平-.斑马鱼gpr112a基因敲除品系的构建)[J].激光生物学报,2022(06):526-532
A类:
gpr112a,GPR112
B类:
斑马鱼,基因敲除,品系,偶联,aGPCRs,一员,基因编码,跨膜结构域,蛋白相互作用,脊椎动物,模式生物,同源基因,幼鱼,成鱼,CRISPR,Cas9,技术构建,鱼品,二外,外显子,sgRNAs,显微注射,F0,嵌合体,野生型,基因型鉴定,杂合子,等位基因,Sanger,自交,纯合子,显微成像,观察发现,受精,dpf,代偿机制
AB值:
0.264928
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