典型文献
MSTN基因突变纯合子兔的繁育和表型分析
文献摘要：
肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因是动物骨骼肌生长的负调控基因.本研究在获得MSTN基因双等位突变原代兔的基础上,培育具有"双肌"表型性状和稳定遗传的MSTN-/-纯合突变兔,建立原代MSTN双等位突变兔繁育纯合子后代的方法.应用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备MSTN-/-突变原代兔,原代双等位突变兔与野生型兔配种,产生F1代兔.同一突变系的F1代兔半同胞交配或回交繁殖F2代纯合子兔;后代兔利用基因组DNAPCR扩增产物序列分析和T载体克隆测序鉴定用于筛选纯合子兔;14-19周龄MSTN基因突变兔称量体重.MSTN基因突变兔臀大肌组织切片,统计分析肌纤维横截面积.获得5只MSTN基因突变原代兔,其中3只用于纯合子培育,共获得15只(5种突变子)纯合突变兔(M2-a:3只;M2-b:2只;M3-a:2只;M7-a:6只;M7-b:2只).在14-19周龄,MSTN-/-纯合突变兔体重极显著高于同龄MSTN+/+野生型兔(平均(2718±120)g和(1 969±53)g,P＜0.01,同龄体重提高38.0％);纯合突变兔的臀大肌纤维平均截面积极显著高于野生型兔((3 512.2±439.2)pm2和(1 274.8±327.3)μm2,P＜0.01),也显著高于MSTN+/-半合子兔((3 512.2±439.2)μm2和(2 610.4±604.4)μm2,P＜0.05).本研究成功培育了5 种MSTN-/-基因纯合突变兔,且有明显瘦肉表型.研究表明,应用CRISPR/Cas9基因编辑获得的原代双等位突变兔为非嵌合体突变兔,突变性状遗传后代;原代双等位突变兔后代分离为两个不同突变子,并都呈现"双肌"表型;F1代单等位突变兔通过近交或回交可获得MSTN-/-纯合突变兔.该研究在利用基因编辑技术培育优良家畜品种方面取得了实验进展.
文献关键词：
肌肉生长抑制素;繁育;突变;CRISPR/Cas9;新西兰兔
中图分类号：
作者姓名：
尚利青;宋绍征;张婷;严坤宁;蔡何清;袁玉国;成勇
作者机构：
扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;无锡太湖学院基础医学系,江苏无锡214064
文献出处：
引用格式：
[1]尚利青;宋绍征;张婷;严坤宁;蔡何清;袁玉国;成勇-.MSTN基因突变纯合子兔的繁育和表型分析)[J].生物工程学报,2022(05):1847-1858
A类：
DNAPCR,突变子,MSTN+
B类：
基因突变,纯合子,繁育,表型分析,肌肉生长抑制素,myostatin,动物骨骼,骨骼肌,负调控基因,双等,等位突变,原代,表型性状,稳定遗传,纯合突变,后代,CRISPR,Cas9,基因编辑技术,野生型,配种,同胞,交配,回交,F2,扩增产物,序列分析,克隆测序,周龄,称量,量体重,臀大肌,肌组织,组织切片,肌纤维,纤维横截面,横截面积,只用,共获,M2,M3,M7,同龄,重提,pm2,瘦肉,嵌合体,体突变,突变性,性状遗传,近交,良家,家畜,新西兰兔
AB值：
0.295537
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