典型文献
CRISPR/Cas9技术在天目地黄RcPDS1基因编辑中的应用
文献摘要：
为了研究CRISPR/Cas9技术在天目地黄基因编辑中的应用,克隆了天目地黄(Rehmannia chingii)的八氢番茄红素脱氢酶基因(RcPDSI),利用PCR方法扩增其cDNA序列和基因组DNA序列.通过构建单靶点CRISPR/Cas9载体,利用根癌农杆菌介导的遗传转化方法侵染天目地黄无菌苗叶盘,通过TA克隆测序法分析基因编辑的类型.结果显示,克隆获得了 1个天目地黄RcPDS1的全长cDNA序列,其具有1个长度为1 743 bp的开放阅读框,编码580个氨基酸残基,基因组DNA序列长度8 041 bp,包含14个内含子和15个外显子.通过遗传转化共获得57个转基因再生株系,其中具明显白化表型的株系有20个(35.09％).TA克隆测序结果显示,RcPDS1靶位点突变类型主要包括碱基缺失、替换和插入.利用CRISPR/Cas9基因编辑技术在天目地黄中成功实现了对RcPDS1基因的靶向敲除.
文献关键词：
天目地黄;CRISPR/Cas9;RcPDS1;基因编辑
中图分类号：
作者姓名：
左鑫;李铭铭;李欣容;苗春妍;李炎杨;杨旭;张重义;王丰青
作者机构：
河南农业大学农学院,郑州450046;福建农林大学农学院,福州350002
文献出处：
引用格式：
[1]左鑫;李铭铭;李欣容;苗春妍;李炎杨;杨旭;张重义;王丰青-.CRISPR/Cas9技术在天目地黄RcPDS1基因编辑中的应用)[J].园艺学报,2022(07):1532-1544
A类：
天目地黄,RcPDS1,RcPDSI
B类：
CRISPR,Cas9,Rehmannia,chingii,八氢番茄红素脱氢酶,酶基因,cDNA,根癌农杆菌,农杆菌介导的遗传转化,转化方法,侵染,无菌苗,叶盘,TA,克隆测序,全长,bp,开放阅读框,氨基酸残基,内含子,外显子,共获,转基因,株系,白化,靶位,位点突变,碱基缺失,基因编辑技术,靶向敲除
AB值：
0.252785
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