典型文献
陆地棉GhCRE1影响种子萌发初探
文献摘要：
为明确陆地棉细胞分裂素受体基因(GhCRE1)在调控植物生长发育中的功能,为研究陆地棉GhCRE1基因调控种子萌发的分子机理提供材料,进一步从分子水平上提高种子萌发率,通过克隆陆地棉GhCRE1基因,利用基因过表达技术将该克隆片段连接至含Ubiquitin启动子的pCUbi1390载体上构建该基因的过表达载体,同时利用CRISPR/Cas9基因编辑技术设计拟南芥CRE1基因的sgRNA片段,合成sgRNA核苷酸序列,从而构建拟南芥CRE1基因靶向敲除载体.将以上2种载体转化农杆菌,使用花序浸染法,以拟南芥为受体材料创建GhCRE1过表达株系及基因编辑功能缺失突变体.接着利用PCR技术和qPCR技术筛选鉴定获得过量表达的GhCRE1拟南芥株系及CRE1功能缺失的拟南芥株系并收获种子,经过对比统计收获的种子与野生型种子在1/2MS培养基上的萌发势进行表型分析,进一步明确陆地棉GhCRE1基因影响种子萌发的功能.结果显示,本研究成功获得了拟南芥GhCRE1过表达株系及CRISPR基因编辑功能缺失突变体株系,且通过数据整理后发现,在种子萌发第2天时,相比野生型,2个过表达转基因株系萌发势分别提高15％和11％左右,而拟南芥CRE1功能缺失型突变体萌发势降低15％左右.该研究揭示,GhCRE1基因过表达能显著提高拟南芥萌发速度.
文献关键词：
陆地棉;GhCRE1基因;过表达;CRISPR/Cas9技术;种子萌发
中图分类号：
作者姓名：
徐敏慧;Josee Ornella Musaniwabo;韩少凡;刘一涵;杜丽桦;刘爱玉;汪启明;屠小菊
作者机构：
湖南农业大学 生物科学技术学院,湖南 长沙 410128;湖南农业大学 农学院,湖南 长沙 410128
文献出处：
引用格式：
[1]徐敏慧;Josee Ornella Musaniwabo;韩少凡;刘一涵;杜丽桦;刘爱玉;汪启明;屠小菊-.陆地棉GhCRE1影响种子萌发初探)[J].华北农学报,2022(03):19-26
A类：
GhCRE1,pCUbi1390,CRE1
B类：
陆地棉,细胞分裂素受体,植物生长发育,基因调控,分子机理,分子水平,种子萌发率,基因过表达,Ubiquitin,启动子,过表达载体,CRISPR,Cas9,基因编辑技术,技术设计,拟南芥,sgRNA,基因靶向,靶向敲除,敲除载体,农杆菌,花序,浸染法,受体材料,株系,缺失突变,突变体,qPCR,技术筛选,筛选鉴定,过量表达,计收,野生型,2MS,表型分析,数据整理,天时,转基因
AB值：
0.262225
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