目的:观察白头翁皂苷A3(A3)通过干预巨噬细胞极化增强人结肠癌SW480细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗的敏感性,并探讨其作用机制.方法:采用CCK8法检测A3对人单核THP-1细胞存活率的影响,确定A3的安全作用浓度;采用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞,将M0型巨噬细胞分为M0对照组,M2模型组,A3低、中、高剂量干预组.其中M2模型组给予20 μg·L-1 IL-4与20 μg·L-1 IL-13进行造模,A3干预组在造模的同时给予低、中、高剂量(50,75,100 mg·L-1)A3进行干预.采用流式细胞术检测M2型巨噬细胞表面抗原CD206的表达;采用RT-PCR法检测M2型巨噬细胞极化因子 CD206、IL-10、CCL22、CCL18 mRNA 的表达;采用 Western blot 法检测细胞内 p-STAT6,CD206、IL-10,CCL22蛋白的表达.A3干预巨噬细胞M2型极化后的细胞上清液作为条件培养基用于考察SW480细胞对5-FU的化疗敏感性,采用CCK8法检测SW480细胞的存活率;采用Annexin-FITC/PI双染法及 Western blot法检测SW480细胞凋亡水平,以及Bax、Cleaved Caspase-3蛋白的表达.结果:A3在50,75,100 mg·L-1浓度时对THP-1细胞存活率没有显著影响.A3呈剂量依赖性减少CD206阳性细胞表达比例,下调p-STAT6、CD206、11-10、CCL22、CCL18基因与蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).A3干预巨噬细胞M2型极化后的条件培养基显著提高了 SW480细胞对5-FU的敏感性,表现为SW480细胞的存活率下降、凋亡率升高,以及促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspase-3表达上调(P＜0.05).结论:A3能够减弱M2型巨噬细胞对SW480细胞凋亡的抑制作用从而提高SW480细胞对5-FU的化疗敏感性,作用机制可能与A3调控STAT6信号通路抑制巨噬细胞M2型极化有关.

白头翁皂苷A3;巨噬细胞极化;STAT6;人结肠癌SW480细胞;5-FU;化疗敏感性

江西中医药大学药学院,江西南昌330004;中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西南昌330006;中药药效(扶正祛邪抗肿瘤)评价重点研究室,江西南昌330006

[1]范泽萍;陈兰英;刘鹏;崔亚茹;罗颖颖-.白头翁皂苷A3通过M2型巨噬细胞提高人结肠癌SW480细胞对5-FU的化疗敏感性)[J].中国医院药学杂志,2022(18):1868-1875

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