目的 探讨延胡索乙素对缺氧(H)/复氧(R)诱导的大鼠心脏微血管内皮细胞(CMECs)损伤的影响及其机制.方法 实验分为正常对照组、模型组、溶媒对照组、延胡索乙素低剂量组、延胡索乙素中剂量组、延胡索乙素高剂量组、延胡索乙素高剂量+蛋白激酶B(Akt)抑制剂组.按试剂盒要求检测CMECs乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,流式细胞术检测CMECs凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blotting)检测CMECs中Akt、磷酸化(p)-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-eNOS、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、活化的Caspase-3(C-Caspase-3)蛋白水平.结果 当延胡索乙素浓度为80μg/mL时,H/R大鼠CMECs存活率最高.与正常对照组相比,模型组CMECs LDH、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、Caspase-3活性、CMECs凋亡率、Bax、C-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均升高,SOD水平、p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS和Bcl-2蛋白表达水平均降低(P<0.05);经低剂量、中剂量、高剂量延胡索乙素作用后,大鼠CMECs LDH、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、Caspase-3活性、CMECs凋亡率、Bax、C-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),而SOD水平、p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS和Bcl-2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且呈延胡索乙素剂量依赖性;给予Akt抑制剂作用后,高剂量延胡索乙素对H/R诱导的大鼠CMECs上述作用逆转(P<0.05).结论 延胡索乙素可保护H/R诱导的大鼠CMECs损伤,可能与激活Akt/eNOS通路有关.

心脏微血管内皮细胞;延胡索乙素;炎症;氧化应激;蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶通路;实验研究

马新豫;关玲霞;张国坡

驻马店市中心医院 河南驻马店 463000

中西医结合心脑血管病杂志

[1]马新豫;关玲霞;张国坡-.基于Akt/eNOS通路探讨延胡索乙素对缺氧/复氧诱导的心脏微血管内皮细胞损伤的保护作用)[J].中西医结合心脑血管病杂志,2022(10):1766-1771

CMECs

Akt,eNOS,延胡索乙素,复氧,氧诱导,心脏微血管内皮细胞,血管内皮细胞损伤,正常对照,溶媒,高剂量,蛋白激酶,试剂盒,乳酸脱氢酶,LDH,半胱氨酸蛋白酶,Caspase,流式细胞术,凋亡率,蛋白质印迹法,Blotting,磷酸化,内皮型一氧化氮合酶,Bcl,Bax,蛋白表达水平,剂量依赖,量依赖性,述作

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