目的:探讨"糖脂清"对高糖诱导的HT22细胞损伤的保护作用机制.方法:将Wistar大鼠随机分成正常组和"糖脂清"、二甲双胍含药血清组,依据成人临床剂量进行灌胃,灌胃后取每组大鼠腹主动脉血并进行离心、灭活、过滤,由此制备不同剂量的"糖脂清"和二甲双胍大鼠含药血清.通过CCK-8法筛选干预HT22细胞最适造模高糖浓度和最佳干预时间,将生长稳定的HT22细胞分为空白组、模型组、二甲双胍含药血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组和高剂量含药血清组,造模组采用最适高糖浓度进行诱导,再对高糖环境下的HT22细胞给予"糖脂清"高、中、低剂量和二甲双胍含药血清进行干预,检测各组HT22细胞氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量;免疫荧光法和Hoechst 33342染色法检测神经元凋亡和Lamp2的表达;Western Blot法检测各组HT22细胞凋亡、自噬相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、SIRT1和JNK表达水平.结果:"糖脂清"能够调节和改善小鼠海马HT22细胞在长期高糖环境下的生长和形态变化,升高SOD含量(P<0.01),降低MDA和LDH水平(P<0.01),对HT22细胞遭受的氧化损伤起到一定程度的保护作用;与模型组相比,"糖脂清"的干预可下调炎症凋亡、自噬相关因子Bax、Caspase-3、SIRT1、JNK蛋白的表达,上调Bcl-2、Lamp2蛋白表达水平(P<0.05).结论:"糖脂清"可显著缓解海马区域神经元凋亡和氧化应激异常状态,并在一定程度上抑制细胞自噬,调控自噬体与溶酶体的结合过程,这些结果为"糖脂清"成为改善2型糖尿病合并认知功能的有效药物提供了全新的思路和方向.

中医药;HT22细胞;糖尿病认知功能障碍;细胞凋亡;细胞自噬

石崯力;王旭;赵云;邱玲艳;徐奚如;孙斯凡

南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210029

中医药信息

[1]石崯力;王旭;赵云;邱玲艳;徐奚如;孙斯凡-.糖脂清方对高糖诱导HT22细胞损伤的保护作用)[J].中医药信息,2022(03):7-15

Lamp2

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