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通窍活血汤含药脑脊液调控ASK1/MKK4/JNK信号通路对OGD/R损伤HT22细胞的保护作用
文献摘要：
该文探讨通窍活血汤含药脑脊液(TQHXD-CSF)对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤小鼠海马神经元(HT22)细胞的保护作用及其作用机制是否与调控ASK1/MKK4/JNK信号通路有关.将HT22细胞随机分为5组,分别为空白脑脊液组(control 组)、OGD/R 组、TQHXD-CSF 组、凋亡抑制剂组(Z-VAD-FMK,20 μmol·L-1)、TQHXD-CSF+凋亡抑制剂组.除 control组外,其余各组细胞在氧糖剥夺6 h后迅速复糖复氧12 h进行OGD/R造模并分组给药.CCK8法检测HT22细胞活力,LDH试剂盒检测乳酸脱氢酶释放量,倒置显微镜观察HT22细胞形态.Western blot检测Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Bax、Bcl-2和caspase-3的mRNA水平.再将HT22细胞随机分为6组,分别为control组、OGD/R组、si-NC组、si-ASK1组、TQHXD-CSF组、TQHXD-CSF+si-ASK1组.CCK8法检测细胞活力,细胞动态分析仪动态监测细胞增殖,Hoechst染色和流式细胞术检测HT22细胞凋亡情况,Western blot检测MKK4、p-MKK4、JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、Cyt C、Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达情况.结果显示,与OGD/R组相比,TQHXD-CSF可以显著提高细胞存活率,改善细胞形态,降低Bax/Bcl-2、caspase-3蛋白和mRNA的表达量.当沉默ASK1后,与OGD/R组相比,TQHXD-CSF组细胞存活率显著提升,降低细胞荧光强度,降低细胞凋亡率,p-MKK4、p-JNK、p-c-Jun、Cyt C、Bax/Bcl-2和caspase-3的蛋白表达量减少,但其效果不及TQHXD-CSF+si-ASK1组.综上,TQHXD-CSF可抑制OGD/R损伤的HT22细胞ASK1/MKK4/JNK通路介导的细胞凋亡,对缺血再灌注神经元细胞损伤具有保护作用.
文献关键词：
通窍活血汤;脑脊液;氧糖剥夺/复糖复氧;HT22细胞;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
袁美玲;张云;汪光云;吴倩;王艳;汪宁
作者机构：
安徽中医药大学,安徽合肥230012;安徽省中药研究与开发重点实验室,安徽合肥230012;安徽省中医科学院中药药效与安全性评价研究所,安徽合肥230012
文献出处：
引用格式：
[1]袁美玲;张云;汪光云;吴倩;王艳;汪宁-.通窍活血汤含药脑脊液调控ASK1/MKK4/JNK信号通路对OGD/R损伤HT22细胞的保护作用)[J].中国中药杂志,2022(19):5274-5283
A类：
TQHXD,CSF+si
B类：
通窍活血汤,含药,脑脊液,ASK1,MKK4,JNK,OGD,HT22,氧糖剥夺,复氧,小鼠海马神经元,control,VAD,FMK,速复,CCK8,细胞活力,LDH,试剂盒,乳酸脱氢酶,释放量,倒置,细胞形态,blot,Bax,Bcl,caspase,qRT,NC,动态分析,Hoechst,流式细胞术,Jun,Cyt,细胞存活率,荧光强度,细胞凋亡率,可抑制,缺血再灌注,神经元细胞,细胞损伤
AB值：
0.183973
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