目的:基于BDNF/TrkB/CREB途径探讨缺氧缺血性新生幼鼠海马神经元凋亡及脑发育损伤发生的相关作用机制.方法:Wistar幼鼠结扎一侧颈总动脉,置8％氧气、92％氮气缺氧箱内2 h,制备缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain injury,HIBI)模型,健康大鼠作为对照组,取对照组、模型组幼鼠各10只,Y迷宫测试学习记忆能力;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑组织损伤情况;蛋白质免疫印迹测定海马组织中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸蛋白激酶B(TrKB)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)的表达.另取对照组15只,模型组幼鼠60只分为阴性对照(negative control,NC)组、BDNF过表达(LV-BDNF)组、TrkB过表达(LV-TrkB)组、CREB过表达(LV-CREB)组,尾静脉注射空白载体、BDNF、TrkB、CREB腺病毒过表达载体.Y迷宫测试学习记忆能力;TTC染色法检测脑组织损伤情况;原位末端转移酶标记法检测海马区神经元凋亡水平;Western blot检测海马组织中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bcl-2 Assaciated X,Bax)及核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的表达.结果:模型组幼鼠学习记忆能力明显降低,脑组织梗死体积明显增大,海马组织中BDNF、TrkB蛋白的表达明显升高,CREB蛋白表达明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);过表达BDNF/TrkB/CREB后,LV-BDNF、LV-TrkB、LV-CREB组幼鼠学习记忆能力明显提高,脑组织梗死体积明显缩小,海马区神经元凋亡明显减少,Bax、NF-κB蛋白表达明显降低,Bcl-2蛋白表达明显增强,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:HIBI模型幼鼠存在BDNF/TrkB/CREB表达异常,过表达BDNF/TrkB/CREB可以改善幼鼠学习记忆能力,修复脑组织损伤,抑制神经元凋亡,因此,HIBI的发生机制可能与BDNF/TrkB/CREB途径有关.

缺氧缺血性脑损伤;神经元凋亡;BDNF;TrkB;CREB

卢田甜;张耀;梁彬;刘敏;陈秀灵;贾雁平

海口市妇幼保健院新生儿科,海南 海口 570203;海口市人民医院儿科,海南 海口 570208

海南医学院学报

[1]卢田甜;张耀;梁彬;刘敏;陈秀灵;贾雁平-.基于BDNF/TrkB/CREB途径探讨缺氧缺血性新生幼鼠海马神经元凋亡及脑发育损伤的机制研究)[J].海南医学院学报,2022(18):1367-1372

Assaciated

BDNF,TrkB,CREB,途径探讨,新生幼鼠,海马神经元凋亡,脑发育,Wistar,结扎,一侧,颈总动脉,氮气,箱内,缺氧缺血性脑损伤,hypoxic,ischemic,brain,injury,HIBI,迷宫,测试学,学习记忆能力,苯基,四氮唑,TTC,脑组织损伤,伤情,蛋白质免疫印迹,定海,海马组织,中脑,脑源性神经营养因子,derived,neurotrophic,酪氨酸蛋白激酶,TrKB,环磷腺苷效应元件结合蛋白,cAMP,response,element,binding,protein,negative,control,NC,LV,尾静脉注射,腺病毒,过表达载体,染色法,转移酶,标记法,测海,海马区,blot,凋亡相关蛋白,cell,lymphoma,Bcl,BCL2,Associated,Bax,核因子,nuclear,kappa,梗死体积,明显增强,发生机制

0.251565