目的 基于ROCK2-shRNA转染技术,探讨温肺降浊方对血管性痴呆大鼠学习、记忆能力及海马组织病理形态的影响.方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、ROCK2干扰组、阴性对照组、中药+ROCK2干扰组,每组10只.除假手术组外,其余组均采用双侧颈总动脉永久性结扎法制备血管性痴呆模型.造模成功后,ROCK2 干扰组及中药+ROCK2 干扰组将AAV9-ROCK2-shRNA注射至大鼠海马组织,ROCK2 干扰组同时给予生理盐水灌胃4周,中药+ROCK2干扰组同时给予温肺降浊方2 g/(kg·d)灌胃4周;阴性对照组同法注射空载体腺相关病毒,同时给予生理盐水灌胃4周;中药组给予温肺降浊方2 g/(kg·d)灌胃4 周,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃4周.分别于术后1周及4周,采用Morris水迷宫测试大鼠学习、记忆能力;术后4周处死各组大鼠,电镜观察海马神经元突触超微结构,尼氏染色法观察海马组织中神经元的分布、形态及尼氏小体数量,Tunel染色检测海马神经元凋亡情况.结果 术后1周,模型组与各干预组大鼠逃避潜伏期、跨越平台次数比较差异均无统计学意义(P均>0.05);术后4周,与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05);与模型组比较,中药组、ROCK2干扰组及中药+ROCK2 干扰组大鼠逃避潜伏期均明显缩短(P均<0.05),跨越平台次数均明显增加(P均<0.05);与ROCK2组及中药组比较,中药+ROCK2干扰组大鼠逃避潜伏期更短(P均<0.05),穿越平台次数更多(P均<0.05).与假手术组比较,模型组大鼠神经元分布散乱,突触形态紊乱,细胞器破裂消失,尼氏小体数目明显减少(P<0.05),海马神经元细胞凋亡数明显增加(P<0.05);与模型组比较,中药组、ROCK2干扰组及中药+ROCK2干扰组大鼠神经元损伤明显改善,海马神经元突触形态及细胞器结构较完整规则,尼氏小体数量明显增加(P均<0.05),海马神经元细胞凋亡数明显减少(P均<0.05);与ROCK2组及中药组比较,中药+ROCK2干扰组大鼠神经元突触形态更规则、细胞器更完整,且尼氏小体数目明显增多(P均<0.05),海马神经元细胞凋亡数明显减少(P均<0.05);中药组与ROCK2干扰组各观察指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 温肺降浊方能明显改善血管性痴呆大鼠的学习与记忆能力,机制可能与其能降低ROCK2表达,进而抑制RhoA/ROCK2信号通路的传导,改善海马神经元结构损伤,减少神经细胞凋亡有关.

温肺降浊方;血管性痴呆;RhoA/ROCK2信号通路;神经再生

向军军;莫雪妮;杨璧璘;李晓琼;林荣清;黎军宏;胡跃强

广西中医药大学第一附属医院,广西 南宁530023;广西中医药大学,广西 南宁530200

现代中西医结合杂志

[1]向军军;莫雪妮;杨璧璘;李晓琼;林荣清;黎军宏;胡跃强-.温肺降浊方联合ROCK2-shRNA转染对血管性痴呆大鼠的神经保护作用)[J].现代中西医结合杂志,2022(13):1753-1758

温肺降浊方,+ROCK2

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