目的:探讨水木和宁方通过调控泛素-蛋白酶体通路(UPP)对帕金森病细胞模型的影响.方法:通过MPP+诱导帕金森病体外细胞模型,利用MTT法检测细胞活性,筛选美多芭、水木和宁方药物干预最佳浓度.药物干预后,采用Real-time PCR法和Western blotting法分别检测与UPP相关的泛素(UB)、泛素激活酶E1(UBE1)、Parkin、泛素羧基端水解酶-L1(UCH-L1)、α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)的mRNA和蛋白表达水平.结果:MTT法筛选MPP+最佳造模浓度为1 mmol/L,水木和宁方、美多芭药物最佳浓度分别为6mg/mL和3.125 μg/mL.镜下观察显示水木和宁方、美多芭对MPP+诱导的PC12细胞具有保护作用,可以提高细胞存活率.Real-time PCR法和Western blotting结果表明,与对照组比较,模型组PC12细胞TH、UB、UBE1、Parkin、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显下调(P＜0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达均明显上调(P＜0.05);与模型组比较,水木和宁方组、美多芭组PC12细胞TH、UB、UBE1、Parkin、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显上调(p＜0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达均明显下调(P＜0.05);与美多芭组比较,水木和宁方组PC12细胞TH、UB、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P＜0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达明显下调(P＜0.05).结论:水木和宁方可能通过调控UPP功能促进异常蛋白降解,减少神经元凋亡,从而发挥抗帕金森病的作用.

帕金森病;水木和宁方;泛素-蛋白酶体通路;细胞凋亡;PC12细胞

张天琪;李传成;邱朝阳;刘萍;翟茜茜;霍青

山东中医药大学,山东济南 250355;临沂市中心医院,山东临沂 276400;潍坊医学院,山东潍坊 261000;山东省妇幼保健院,山东 济南 250014;山东中医药大学附属医院,山东济南 250011

中医药导报

[1]张天琪;李传成;邱朝阳;刘萍;翟茜茜;霍青-.水木和宁方通过调控泛素-蛋白酶体通路对MPP+诱导帕金森病体外模型细胞损伤的影响)[J].中医药导报,2022(03):7-12

水木和宁方,UBE1

泛素,蛋白酶体,MPP+,病体,体外模型,细胞损伤,UPP,帕金森病细胞模型,体外细胞,MTT,细胞活性,选美,美多芭,方药,药物干预,最佳浓度,Real,blotting,Parkin,羧基端,端水,水解酶,L1,UCH,突触核蛋白,syn,酪氨酸羟化酶,TH,蛋白表达水平,6mg,PC12,细胞存活率,蛋白降解,神经元凋亡

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