为探究布鲁氏菌外膜蛋白10(OMP10)介导小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDC)的活化机制及其对小鼠T淋巴细胞增殖的影响.本研究通过体外分离培养BMDC细胞6 d后,将重组OMP10(rOMP10)与BMDC共孵育24h,经流式细胞术分析BMDC表面共刺激分子(CD40、CD80、CD86)的表达情况,结果显示,与PBS组相比,rOMPI0孵育BMDC能够诱导细胞表面共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达量显著升高(P＜0.001).同时采用ELISA检测共孵育后BMDC细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-12、IL-10、IL-4)的表达情况,结果显示,与PBS组相比,rOMP10孵育BMDC能够诱导其细胞因子(IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ)表达量极显著升高(P＜0.01),但IL-4和IL-10的表达量极显著降低(P＜0.001).进一步采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测共孵育后BMDC的Toll样受体(TLRs)和MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子的mRNA转录水平,结果显示,与PBS组相比,rOMP10能够诱导BMDC的TLR2和TLR4(P＜0.05),以及抗原递呈相关分子MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ的mRNA转录水平极显著升高(P＜0.01).另外,将小鼠脾脏T淋巴细胞与rOMP10预处理的BMDC共孵育后,经MTT试验检测T淋巴细胞增殖效率,结果显示,rOMP10处理组比PBS组T淋巴细胞的刺激指数增加2倍以上,且在树突状细胞和淋巴细胞比值(DCs∶T)为1∶50时,rOMP10处理组的T淋巴细胞增殖效率最高.综上所述,本研究首次证实布鲁氏菌OMP10能够诱导BMDC的活化,促进抗原递呈分子的转录,从而介导T淋巴细胞的高效增殖,该结果为解析布鲁氏菌感染与宿主免疫机制奠定实验基础,同时也为布鲁氏菌新型亚单位疫苗研发提供数据支持.

布鲁氏菌;外膜蛋白OMP10;小鼠骨髓源树突状细胞;抗原递呈;T淋巴细胞增殖

徐朕宇;王月丽;易继海;童志霞;邓肖玉;杨宁宁;徐明国;王勇;孟闯;苗玉和;陈创夫

石河子大学动物科技学院,新疆 石河子 832000;绵羊健康养殖与人兽共患病防控协同创新中心,新疆 石河子 832000;江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009;福建省圣维生物科技有限公司,福建 南平 350000

中国预防兽医学报

[1]徐朕宇;王月丽;易继海;童志霞;邓肖玉;杨宁宁;徐明国;王勇;孟闯;苗玉和;陈创夫-.布鲁氏菌0MP10介导的小鼠骨髓源树突状细胞活化及其对小鼠T细胞增殖影响的研究)[J].中国预防兽医学报,2022(10):1084-1090

0MP10,OMP10,rOMP10,rOMPI0

小鼠骨髓源树突状细胞,细胞活化,增殖影响,布鲁氏菌外膜蛋白,BMDC,活化机制,淋巴细胞增殖,外分,分离培养,孵育,24h,流式细胞术,共刺激分子,CD40,CD80,CD86,PBS,细胞表面,IFN,qRT,Toll,样受体,TLRs,MHC,转录水平,TLR2,TLR4,抗原递呈,脾脏,MTT,试验检测,增殖效率,淋巴细胞比值,DCs,综上所述,布鲁氏菌感染,宿主免疫,免疫机制,亚单位疫苗,疫苗研发

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