为研究太子参参须多糖(RPFRP)对模式抗原卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠的佐剂作用,本研究将60只雌性ICR小鼠随机分成空白对照组(CK组),单独免疫OVA组(OVA组),OVA+RPFRP低、中、高(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)剂量组(D、Z、G组).在实验的第1 d～5 d和第16 d～20 d,除CK组和OVA组小鼠灌胃(ig)双蒸水之外,其他组小鼠分别灌胃对应剂量的RPFRP.第6d和第21 d,除CK组小鼠经皮下注射0.2 mL PBS外,其余各组小鼠均经皮下注射OVA溶液0.2 mL(抗原含量≥99.9％),共免疫2次.第36 d迫杀各组小鼠,分别采用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数(SI)及NK细胞活性,结果显示:与OVA组相比,OVA+各剂量RPFRP均能够显著提高T细胞的SI值(P＜0.05),其中低、中剂量的RPFRP能够显著提高淋巴细胞的SI值.OVA+各剂量RPFRP组小鼠NK细胞的杀伤活性与CK和OVA组差异均不显著(P＞0.05);采用ELISA法检测各组小鼠血清中细胞因子、特异性IgG抗体及其亚类含量,结果显示,与OVA组相比,OVA+各剂量RPFRP组的细胞因子含量及血清中IgG1抗体水平均有所提高但均差异不显著,G、Z组IgG2a抗体水平显著升高(P＜0.05),G组IgG和IgG2b抗体水平均显著升高(P＜0.05);采用RT-qPCR法检测各组小鼠脾淋巴细胞中的细胞因子以及转录因子的转录水平,结果显示,与OVA组相比,OVA+各剂量RPFRP组IL-4、IL-10、IFN-γ、转录因子T-bet、GATAmRNA转录水平和T-bet/GATA比值均无显著提高,仅G、Z组IL-2 mRNA的转录水平显著升高(P＜0.05);采用流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群数量及CD4+/CD8+T细胞的比值,结果显示,与OVA组相比,G、Z组小鼠脾细胞中的CD3+、CD8+T细胞及G组CD4+T细胞数量均显著升高(P＜0.05),而G、Z组的CD4+/CD8+T细胞比值明显降低(P＜0.05),接近CK组的该比值.上述结果表明,RPFRP能在一定程度上提高小鼠脾淋巴细胞的增殖水平、NK细胞杀伤活性,调节IgG及其亚类抗体的分泌水平,调节相关细胞因子、转录因子的转录水平等,从而能在一定程度上提高小鼠对OVA的免疫应答能力,表现出一定的佐剂作用.本研究可丰富RPFRP的免疫学内容,为进一步寻找高效、无毒、安全的中药免疫佐剂提供一定数据参考.

太子参参须多糖;免疫模式抗原;小鼠;佐剂;免疫功能

曾丽;甘思言;杜蓥蓥;乔石;张炎达;黄一帆;王全溪;马玉芳

中西兽医结合与动物保健福建省高等学校重点实验室,福建 福州 350002;福建省兽医中药与动物保健重点实验室(福建农林大学),福建 福州 350002;福建贝迪药业有限公司,福建 宁德 355399

中国预防兽医学报

[1]曾丽;甘思言;杜蓥蓥;乔石;张炎达;黄一帆;王全溪;马玉芳-.太子参参须多糖对小鼠OVA蛋白的免疫佐剂作用研究)[J].中国预防兽医学报,2022(06):648-654,681

OVA+RPFRP,GATAmRNA,免疫模式抗原

太子参参须多糖,免疫佐剂,清白,雌性,ICR,空白对照,50mg,100mg,200mg,灌胃,ig,双蒸水,6d,皮下注射,PBS,抗原含量,MTT,小鼠脾淋巴细胞,淋巴细胞增殖,细胞增殖指数,SI,NK,细胞活性,杀伤活性,小鼠血清,亚类,IgG1,抗体水平,均差,IgG2a,IgG2b,qPCR,转录水平,IFN,bet,流式细胞术,脾细胞,CD3+,CD8+T,淋巴细胞亚群,CD4+T,细胞数量,高小,细胞的增殖,类抗体,泌水,免疫应答,免疫学,无毒

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