典型文献
人胶质瘤U251细胞异柠檬酸脱氢酶1基因转染条件的建立和验证
文献摘要:
目的 建立适用于U251细胞异柠檬酸脱氢酶1基因(IDH1)过表达的最佳转染方案,并通过筛选获得稳定转染的IDH1过表达人胶质瘤U251细胞系.方法 利用jetPRIME试剂将IDH1 Human Mutant ORF Clone和pCMV6-Entry Tagged Cloning Vector转染至U251细胞内.通过增殖实验获得筛选所用抗生素G418浓度,用该浓度筛选稳定的IDH1过表达和空白质粒转染成功的U251细胞.采用RT-PCR和Western blot实验验证转染实验和IDH1基因和蛋白的表达情况.结果 IDH1转染U251细胞株成功表达IDH1基因及IDH1蛋白,筛选及培养所需G418浓度为300 mg/L.IDH1转染组细胞表达IDH1基因及蛋白均高于空白质粒组(VCT组),差异有统计学意义(P<0.05),转染实验成功.结论 成功建立适用于U251细胞IDH1过表达的最佳转染方案,可通过筛选获得稳定转染的IDH1过表达和空白质粒对照的人胶质瘤U251细胞系.
文献关键词:
IDH1基因;转染;胶质瘤
中图分类号:
作者姓名:
丁楠;苏婷;许琳婧
作者机构:
大连市公共卫生临床中心检验科,辽宁 大连 116033;大连市儿童医院检验科,辽宁 大连 116000
文献出处:
引用格式:
[1]丁楠;苏婷;许琳婧-.人胶质瘤U251细胞异柠檬酸脱氢酶1基因转染条件的建立和验证)[J].当代医学,2022(10):26-28
A类:
jetPRIME,Tagged
B类:
胶质瘤,U251,异柠檬酸脱氢酶,基因转染,IDH1,过表达,过筛,稳定转染,达人,细胞系,Human,Mutant,ORF,Clone,pCMV6,Entry,Cloning,Vector,G418,浓度筛选,质粒转染,染成,blot,细胞株,粒组,VCT
AB值:
0.296891
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