目的:探讨狐猴酪氨酸激酶2(LMTK2)基因沉默对人上皮性卵巢癌(EOC)细胞生长和转移的抑制作用及其可能的机制.方法:通过RT-qPCR和Western-blot检测了人正常卵巢上皮细胞IOSE80和人上皮性卵巢癌细胞系(SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY)中LMTK2的表达,使用Lipofectamine 3000转染试剂将LMTK2的短发夹RNA(shRNA)、阴性对照shRNA、LMTK2过表达重组pcDNA3.1质粒或阴性对照质粒转染到SKOV3细胞中,并分为LMTK2-shRNA组、NC-shRNA组、LMTK2-pcDNA3.1组或NC-pcDNA3.1组.另外,使用PI3K/Akt抑制剂LY294002处理SKOV3细胞1 h.通过CCK-8法测定细胞增殖,Annexin V-FITC/PI染色法测定细胞凋亡,划痕实验评价细胞迁移,Transwell实验评价细胞侵袭.对BALB/c雌性裸鼠皮下注射转染NC-shRNA或LMTK2-shRNA的SKOV3细胞建立体内移植瘤模型,并记录接种28 d内的肿瘤体积.结果:与人正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,卵巢癌细胞系(SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY)中LMTK2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高,其中SKOV3的LMTK2 mRNA和蛋白表达水平最高(P＜0.05).与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞活力、相对迁移面积、侵袭细胞数均显著降低,而细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).此外,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞中Bax的蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、MMP2、MMP9、p-Akt的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).LY294002处理逆转了上调LMTK2对SKOV3细胞生长和转移的影响(P＜0.05).在接种第21天和28天时,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组裸鼠的肿瘤体积显著降低(P＜0.05).结论:LMTK2基因沉默通过抑制PI3K/Akt信号通路降低了人上皮性卵巢癌细胞的生长和转移能力.

上皮性卵巢癌(EOC);狐猴酪氨酸激酶2(LMTK2);细胞增殖;转移;PI3K/Akt信号通路

李胜男;陈必良;朱媛媛;武雁;赵丽莎

空军军医大学第一附属医院妇产科 陕西西安710032;空军军医大学基础医学院神经生物学实验室 陕西西安710032

现代生物医学进展

[1]李胜男;陈必良;朱媛媛;武雁;赵丽莎-.LMTK2基因沉默抑制人上皮性卵巢癌细胞生长和转移的作用机制)[J].现代生物医学进展,2022(11):2034-2041

LMTK2,HEY

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