目的:通过体外细胞培养探讨miR-1298对缺血缺氧性神经损伤的调节作用.方法:首先通过细胞活性检测和乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性法确定大鼠PC-12细胞糖氧剥夺/复氧(OGD/R)的造模效果,同时采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-1298 的表达差异.体外转染 miR-1298mimic、mimic NC、miR-1298 inhibitor 和 inhibitor NC 至大鼠 PC-12 细胞系,检测mimic、mimic NC、inhibitor、inhibitor NC 的转染效率.经过 OGD/R 处理后将细胞分为 Control 组、OGD/R 组、mimic 组、mimicNC组、inhibitor组和inhibitorNC组.流式细胞术检测各组PC-12细胞凋亡的情况,免疫印迹试验(Western blot)检测各组PC-12细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)和Bcl-2相关的x基因(Bax)表达的情况.结果:PC12细胞经过OGD/R处理后,其细胞存活率与Control组比明显下降且LDH漏出率明显上升(均P＜0.05);模型细胞中miR-1298相对表达量明显低于Control组(P＜0.05).转染24小时后mimic组细胞中miR-1298的相对表达量明显高于mimicNC组(P＜0.05);mimic组细胞凋亡率低于mimicNC组,而inhibitor组细胞凋亡率高于inhibitor NC组(均P＜0.05);mimic组的BCL-2表达量较mimicNC组升高,而BAX表达量下降,inhibitor组与inhibitorNC组相比,BCL-2表达量下降,而BAX表达量上升,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论:miR-1298通过抑制细胞凋亡减轻PC-12细胞OGD/R的损伤.

miR-1298;PC-12细胞;糖氧剥夺/复氧;凋亡;BCL-2;BAX

鞠加圣;陈建良;杨云峰;彭智涛;钟远强;杨淬

中山大学附属第八医院神经外科 广东深圳518000;云南民族大学民族医药学院重点实验室 云南昆明650500

现代生物医学进展

[1]鞠加圣;陈建良;杨云峰;彭智涛;钟远强;杨淬-.miR-1298表达对PC-12细胞糖氧剥夺/复氧损伤的影响及其机制研究)[J].现代生物医学进展,2022(12):2212-2216

1298mimic,mimicNC,inhibitorNC

miR,糖氧剥夺,复氧,体外细胞,细胞培养,培养探讨,缺血缺氧,缺氧性,神经损伤,过细,细胞活性,活性检测,乳酸脱氢酶,LDH,细胞毒性,OGD,qPCR,表达差异,细胞系,转染效率,Control,流式细胞术,免疫印迹试验,blot,凋亡相关蛋白,BCL,Bcl,Bax,PC12,细胞存活率,漏出,相对表达量,细胞凋亡率,BAX

0.224313