目的 探讨肺癌患者血清外泌体miR-21对肺癌细胞生长和转移的影响及机制.方法 收集18例健康志愿者和20例肺癌患者的血清,提取并鉴定血清外泌体(记为Normal exo和LCA exo),qRT-PCR检测Normal exo和LCA exo中miR-21的表达水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-21与PTEN的靶向关系,肺癌细胞A549中转染miR-NC(miR-NC组)、miR-21 mimic(miR-21组)、miR-21 mimic+PTEN质粒(miR-21+PTEN组)后,CCK8法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测PTEN蛋白表达.将10μg/mL时Normal exo和LCA exo及等体积的PBS(Normal exo组、LCA exo组、PBS组)与A549细胞共孵育,检测细胞中miR-21表达,PTEN蛋白表达,细胞增殖、迁移和侵袭能力.A549细胞与10μg/mL时LCA exo共孵育后转染PTEN质粒(LCA exo+PTEN组),然后检测细胞增殖、迁移和侵袭能力.Western blot检测PBS组、Normal exo组、LCA exo组和LCA exo+PTEN组A549细胞中磷酸酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平.结果 Normal exo和LCA exo符合外泌体的结构及生物学特征.LCA exo组中miR-21表达显著高于Normal exo组(P<0.001).PTEN为miR-21的靶基因,与miR-NC组比较,miR-21组A549细胞PTEN表达下调(P<0.001),细胞增殖、迁移、侵袭能力显著增加(P<0.05).与miR-21组比较,miR-21+PTEN组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著降低(P<0.05).相比于PBS组,LCA exo组细胞PTEN表达显著下调(P<0.001),细胞增殖、迁移、侵袭能力显著增加(P<0.05),PI3K和AKT磷酸化水平显著增加(P<0.001);与LCA exo组比较,LCA exo+PTEN组A549细胞增殖、迁移、侵袭能力显著降低(P<0.05),PI3K和AKT磷酸化水平显著降低(P<0.001).结论 肺癌患者血清外泌体传递miR-21靶向PTEN促进肺癌细胞的生长和转移.

肺癌;血清外泌体;miR-21;生长;转移;磷酸酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路

新疆医科大学附属中医医院呼吸与危重症医学科,新疆乌鲁木齐 830002

[1]张茜;同立宏;马红霞-.血清外泌体miR-21靶向PTEN激活PI3K/AKT信号通路诱导肺癌细胞的生长和转移的机制分析)[J].国际检验医学杂志,2022(12):1479-1484,1490

mimic+PTEN,21+PTEN,exo+PTEN

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