目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)BCYRN1在结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T-cell lymphoma,ENKTCL)糖酵解激活中的作用及其机制.方法 收集2010—2021年于首都医科大学附属北京同仁医院诊治的236例ENKTCL患者信息,分析空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)与无疾病进展生存(progression-free survival,PFS)的相关性;采用qRT-PCR检测32例初诊ENKTCL患者组织中的BCYRN1含量并分析其与PFS的相关性.利用质粒转染法构建过表达BCYRN1(OE-BCYRN1组)和干扰BCYRN1(shBCYRN1组)的ENKTCL SNK-6细胞株,采用Screen QuestTM比色法检测葡萄糖摄取能力,用乳酸检测试剂盒检测乳酸的生成能力;采用qRT-PCR和Western blot法检测糖酵解关键分子PKM2、HIF-1α、SLC2A1、LDHA和PDK1的表达水平;分别添加蛋白合成抑制剂、溶酶体抑制剂或激活剂后观察BCYRN1对PKM2稳定性的影响.采用RNA pull-down和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验判断BCYRN1与PKM2相互作用的模式.结果 236例ENKTCL患者中,高血糖组(FBG>5.6 mmol/L)49例,正常血糖组(FBG≤5.6 mmol/L)187例,高血糖组5年PFS率低于低血糖组(32.1％vs 63.7％,P<0.001);BCYRN1高表达组3年PFS率低于低表达组(26.1％vs 82.5％,P=0.014).干扰BCYRN1后,ENKTCL SNK-6细胞对葡萄糖的摄取量和乳酸生成水平均显著降低(均P<0.05);过表达BCYRN1后,糖酵解关键分子PKM2、HIF-1α、SLC2A1、LDHA和PDK1的表达量均显著升高(均P<0.05).应用蛋白合成抑制剂(放线菌酮)分别处理SNK-6细胞3 h和6 h后,OE-BCYRN1组中PKM2的降解比例均显著低于OE-CTRL组(均P<0.05),而shBCYRN1组中PKM2的降解比例均显著高于shCTRL组(均P<0.05).经溶酶体抑制剂(Leupeptin)处理后shBCYRN1+Leupeptin组的PKM2降解比例明显下降(P<0.01);经溶酶体激活剂(6-Aminonicotinamide,6-AN)处理后OE-BCYRN1+6-AN组的PKM2降解比例显著增加(P<0.001).RNA pull-down和RIP实验显示BCYRN1基因可与PKM2蛋白发生直接相互作用.结论 BCYRN1可能通过溶酶体途径上调PKM2表达而激活ENKTCL糖酵解途径.

结外NK/T-细胞淋巴瘤;糖酵解途径;长链非编码RNA;BCYRN1;PKM2

傅芮莹;刘辛迪;梁远征;刘雪琳;王亮

100730 北京 首都医科大学附属北京同仁医院血液内科

中国癌症防治杂志

[1]傅芮莹;刘辛迪;梁远征;刘雪琳;王亮-.lncRNA BCYRN1在结外NK/T细胞淋巴瘤糖酵解激活中的作用及其机制研究)[J].中国癌症防治杂志,2022(04):370-377

BCYRN1,shBCYRN1,QuestTM,shCTRL,Leupeptin,shBCYRN1+Leupeptin,Aminonicotinamide,BCYRN1+6

lncRNA,结外,细胞淋巴瘤,长链非编码,long,coding,extranodal,cell,lymphoma,ENKTCL,首都医科大学,北京同仁医院,患者信息,空腹血糖,fasting,blood,glucose,FBG,疾病进展,progression,free,survival,PFS,qRT,初诊,患者组织,质粒转染,过表达,OE,SNK,细胞株,Screen,比色法,葡萄糖摄取,检测试剂盒,生成能力,blot,关键分,PKM2,HIF,SLC2A1,LDHA,PDK1,蛋白合成,溶酶体,激活剂,后观,pull,down,结合蛋白,免疫沉淀,RIP,高血糖,低血糖,低表达,摄取量,放线菌酮,别处,降解比,AN,白发,糖酵解途径

0.255587