目的 探讨miR-483-3p对脂多糖(LPS)诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响及可能机制.方法 LPS诱导小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-483-3p和磷酸酪氨酸衔接蛋白1(APPL1)mRNA表达水平,酶联免疫吸附法检测细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western Blot)法检测细胞中APPL1、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)蛋白表达水平.转染miR-483-3p抑制剂或APPL1过表达载体构建miR-483-3p表达干扰或APPL1过表达小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞.LPS诱导干扰miR-483-3p表达或过表达APPL1的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞后,上述相同方法检测细胞中MDA和SOD水平、细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-483-3p与APPL1调控关系.结果 LPS诱导细胞后,细胞中miR-483-3p和MDA表达、细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高(P<0.05),APPL1的mRNA和蛋白、SOD活性及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).干扰miR-483-3p表达或过表达APPL1后,LPS诱导的细胞中MDA含量、凋亡率和Bax蛋白表达降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05).miR-483-3p在小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中靶向负调控APPL1表达.抑制APPL1表达逆转了干扰miR-483-3p对LPS诱导的细胞中MDA和SOD水平、细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.结论 干扰miR-483-3p表达可能通过负调控抑制APPL1表达抑制LPS诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞氧化应激和凋亡,减轻细胞损伤.

miR-483-3p;APPL1;Ⅱ型肺泡上皮细胞;氧化应激;凋亡

于智轩;高映春

111000 辽宁省辽阳市中心医院ICU

河北医药

[1]于智轩;高映春-.miR-483-3p靶向APPL1对脂多糖诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响)[J].河北医药,2022(03):325-329,335

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