典型文献
Eya1基因S298A突变型过表达慢病毒载体的构建及其对MES23.5细胞凋亡的影响
文献摘要：
目的 构建小鼠Eya1第298位丝氨酸(S)突变为丙氨酸(A)的慢病毒表达载体,并探讨Eya1的298位点突变对MES23.5多巴胺能细胞凋亡的影响.方法 采用PCR法、Golden Gate技术和LR反应构建携带Eya1S298A基因的慢病毒重组表达质粒.嘌呤霉素筛选稳定表达Eya1S298A的MES23.5细胞株.将稳定表达Eya1S298A或Eya1的MES23.5细胞经6-羟多巴胺处理2 h,构建细胞损伤模型.CCK8法和Western blot法检测298位点突变对细胞活力和Bcl-2蛋白表达的影响.结果 测序结果和PCR结果表明Eya1基因的第298位S被突变为A,Eya1S298A基因成功连接于慢病毒载体.CCK8结果表明,Eya1S298A突变组的细胞活力水平明显低于Eya1野生组(P<0.05).Western blot结果表明,突变组Bcl-2蛋白表达水平明显低于野生组(P<0.05).结论 成功构建含Eya1S298A基因的慢病毒表达质粒,并建立稳定表达Eya1S298A的细胞株;Eya1的298位点突变降低了Eya1对MES23.5细胞的抗凋亡作用.
文献关键词：
Eya1;定点突变;MES23.5细胞;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
武秀香;曹夏银;高锦
作者机构：
徐州医科大学神经生物学教研室,江苏 徐州 221004
文献出处：
引用格式：
[1]武秀香;曹夏银;高锦-.Eya1基因S298A突变型过表达慢病毒载体的构建及其对MES23.5细胞凋亡的影响)[J].徐州医科大学学报,2022(01):1-6
A类：
Eya1,S298A,MES23,Eya1S298A
B类：
突变型,过表达,慢病毒载体,丝氨酸,丙氨酸,慢病毒表达载体,位点突变,多巴胺,Golden,Gate,LR,病毒重组,重组表达,质粒,嘌呤霉素,稳定表达,细胞株,细胞损伤,损伤模型,CCK8,blot,细胞活力,Bcl,蛋白表达水平,抗凋亡,凋亡作用,定点突变
AB值：
0.195358
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