典型文献
胃癌细胞中TWIST慢病毒表达载体的构建及鉴定
文献摘要：
目的 探讨胃癌细胞中TWIST慢病毒表达载体的构建及构建.方法 参考Genbank的人TWIST基因序列设计出1对TWIST全基因扩增引物,从人胃癌多药耐药细胞SGC7901/VCR中扩增TWIST基因,聚合酶链反应(PCR)产物线性化克隆入慢病毒表达载体GV341中,构建重组载体GV341-TWIST.将重组载体GV341-TWIST转染至人胃癌293T细胞包装病毒,免疫荧光检测293T细胞形态改变,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞TWIST表达水平,实时PCR法检测病毒滴度.结果 成功构建了GV341-TWIST慢病毒表达载体,经限制性酶切后出现651 bp的条带,DNA测序分析证实重组慢病毒载体GV341-TWIST的插入序列有近100％的正确率,重组慢病毒载体转染293T细胞后,Western blot检测TWIST融合蛋白为25 kD.实时PCR测定重组慢病毒载体GV341-TWIST病毒滴度2.00E+8 TU/ml.结论 本实验成功构建了人重组慢病毒载体GV341-TWIST慢病毒表达载体,在人胃癌293T细胞中高效表达了TWIST蛋白.
文献关键词：
TWIST;慢病毒载体;胃癌
中图分类号：
作者姓名：
郭雪艳;蔺敏;刘贵生;金燕;阎春英;高淑娟
作者机构：
陕西省人民医院消化内科,西安 710068;宝鸡市人民医院呼吸内科,陕西 宝鸡 7210000
文献出处：
引用格式：
[1]郭雪艳;蔺敏;刘贵生;金燕;阎春英;高淑娟-.胃癌细胞中TWIST慢病毒表达载体的构建及鉴定)[J].癌症进展,2022(18):1876-1879,1883
A类：
GV341,00E+8
B类：
胃癌细胞,TWIST,慢病毒表达载体,Genbank,基因序列,序列设计,全基因扩增,扩增引物,多药耐药,SGC7901,VCR,聚合酶链反应,线性化,重组载体,转染,293T,装病,免疫荧光检测,细胞形态,形态改变,蛋白质印迹法,blot,病毒滴度,限制性,bp,条带,测序分析,重组慢病毒,慢病毒载体,插入序列,列有,融合蛋白,kD,TU,ml,高效表达
AB值：
0.228152
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