目的 探讨核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)介导的铁蛋白(Ferritin)自噬是否参与脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症心肌细胞铁死亡的发生.方法 采用不同剂量(5、10、20μg/mL)的LPS诱导大鼠心肌细胞H9c2形成脓毒症心肌细胞损伤体外模型,以正常H9c2细胞作为Control组.应用试剂盒检测心肌细胞活力、Fe2+、心肌酶释放水平变化与氧化应激水平;荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平变化;免疫荧光检测NCOA4、Ferritin在心肌细胞中的表达定位;应用小干扰RNA(si RNA)降低H9c2细胞中的NCOA4的表达,Western blot检测铁死亡调控蛋白、自噬蛋白表达水平.结果 不同剂量LPS刺激后H9c2细胞活力明显降低(P＜0.05),Fe2+浓度升高(P＜0.05),丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)等细胞氧化应激的水平升高(P＜0.05),线粒体膜电位降低(P＜0.05),荧光镜下观察到NCOA4-Ferritin共定位表达增加(P＜0.05),铁死亡调控蛋白NCOA4表达增加(P＜0.05),Ferritin、SLC7A11、GPX4的表达水平下降(P＜0.05),自噬蛋白LC3-Ⅱ表达增加(P＜0.05).慢病毒敲低NCOA4表达,Ferritin、SLC7A11、GPX4的表达增加(P＜0.05),LC3-Ⅱ表达水平下降(P＜0.05).结论 NCOA4介导的铁蛋白自噬参与了脓毒症心肌细胞铁死亡的发生过程.

铁蛋白自噬;铁死亡;脓毒症;心肌细胞损伤

郭立春;曹国栋;罗茜晴;林靓;赵宇含;曾佑成;张艺馨;程青虹

832000新疆石河子,石河子大学医学院;832000新疆石河子,石河子大学医学院第一附属医院重症二科

陆军军医大学学报

[1]郭立春;曹国栋;罗茜晴;林靓;赵宇含;曾佑成;张艺馨;程青虹-.NCOA4介导的铁蛋白自噬参与LPS诱导的心肌细胞铁死亡)[J].陆军军医大学学报,2022(23):2401-2408

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