典型文献
诺如病毒和轮状病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立
文献摘要：
为了建立一种能同时检测GⅠ型诺如病毒(GⅠ-NV)、GⅡ型诺如病毒(GⅡ-NV)和A群轮状病毒(A-RV)的三重荧光定量PCR检测方法,本试验根据GⅠ-NV和GⅡ-NV的开放阅读框1(Orfl)与开放阅读框2(Orf2)基因之间保守序列、A-RV的非结构蛋白3(Nsp3)基因保守序列,分别设计合成3对特异性引物和3个TaqMan探针,人工合成含有目标序列的基因,制备重组质粒标准品,绘制标准曲线,并对该检测方法的特异性、灵敏度、重复性进行评估.同时通过检测收集的109份动物源食品样品,对建立的方法与商品化试剂盒进行检测比对.结果显示:该方法可以特异性地区分GⅠ-NV、GⅡ-NV和A-RV,而与其他病原无交叉反应;该方法的最低检出限均为1×102copies/μL的质粒标准品,具有较高的敏感性;组内和组间重复性试验结果显示,变异系数均小于5％,重复性较好;该方法与商品化的试剂盒检测结果符合率为100％.结果表明,本试验建立的检测方法能够快速、准确区分GⅠ-NV、GⅡ-NV和A-RV.
文献关键词：
诺如病毒;轮状病毒;三重荧光定量PCR;标准曲线;动物源食品
中图分类号：
作者姓名：
安微;郑晶;车颖欣;陈世界;张婧;杨苗;谢礼;林华
作者机构：
成都海关技术中心,四川成都610041;食品安全检测四川省重点实验室,四川成都610041
文献出处：
引用格式：
[1]安微;郑晶;车颖欣;陈世界;张婧;杨苗;谢礼;林华-.诺如病毒和轮状病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立)[J].中国兽医杂志,2022(08):49-54,58
A类：
Orfl,Orf2,Nsp3
B类：
诺如病毒,轮状病毒,同时检测,NV,RV,开放阅读框,保守序列,非结构蛋白,设计合成,特异性引物,TaqMan,人工合成,目标序列,重组质粒,标准品,标准曲线,动物源食品,食品样品,商品化,试剂盒,原无,交叉反应,低检出限,102copies,重复性试验,符合率
AB值：
0.27964
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