目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响.方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路相关基因在胰岛β细胞中的表达变化;用免疫荧光法检测并比较野生型小鼠和db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞中STING蛋白的表达差异;用STING特异性激动剂5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸(DMXAA)处理3种常用的小鼠胰岛β细胞系(NIT-1、Min6及beta-TC-6),并通过RT-qPCR和Western blot分别检测其STING信号通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平变化;用毒胡萝卜素(TG)诱导上述β细胞系内质网应激,通过Western blot检测STING信号通路相关蛋白的表达及磷酸化水平,并通过CCK-8法检测胰岛β细胞活力.结果:人胰岛β细胞中存在STING信号通路主要基因mRNA的表达,但在健康人群和糖尿病患者的表达水平无显著差异.免疫荧光结果表明,野生型小鼠和db/db小鼠胰岛β细胞的STING蛋白均在细胞核周边富集,且在db/db小鼠β细胞的表达量更高.在3种小鼠β细胞系中,只有beta-TC-6细胞具有较显著的STING表达,并能被STING通路激动剂DMXAA激活.TG能同时引起beta-TC-6细胞的内质网应激和STING通路激活;与STING激动剂联合处理可协同抑制细胞的活力.结论:人和小鼠胰岛β细胞及小鼠胰岛β细胞系beta-TC-6均表达STING信号通路的主要组分.在beta-TC-6细胞中,内质网应激能激活STING通路;内质网应激与STING通路可协同作用降低β细胞活力.

糖尿病;干扰素基因刺激因子;单细胞测序;内质网应激;胰岛β细胞;细胞活力

彭荣东;何学敏;王瑨;文哲瑶;艾鹤英;朱延华;鲁岩;石国军;陈燕铭

中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科,广州市肥胖分子机理与转化重点实验室,广东省糖尿病防治重点实验室,广东广州510275;中山大学附属第三医院临床免疫中心,广东广州510275

中国病理生理杂志

[1]彭荣东;何学敏;王瑨;文哲瑶;艾鹤英;朱延华;鲁岩;石国军;陈燕铭-.内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力)[J].中国病理生理杂志,2022(05):809-818

内质网应激,STING,细胞活力,干扰素基因刺激因子,生物信息学分析,序数,表达变化,免疫荧光法,野生型,db,糖尿病小鼠,表达差异,激动剂,二甲基,呫吨,DMXAA,细胞系,NIT,Min6,beta,qPCR,blot,蛋白表达水平,表达水平变化,用毒,毒胡萝卜素,磷酸化,CCK,健康人群,糖尿病患者,细胞核,联合处理,协同抑制,主要组分,单细胞测序

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