典型文献
禽腺病毒血清4型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立与应用
文献摘要：
为建立禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV4)临床检测方法,根据GenBank中该病毒Hexon基因序列设计扩增引物,将扩增的Hexon基因连接至pEASY-Blunt载体,构建重组质粒pEASY-Blunt-Hexon,同时对Hexon基因进行分析,选取高度保守区域,设计荧光定量检测引物,建立FAdV4 SYBR Green I荧光定量PCR检测方法.该方法扩增产物长度为95 bp,最低检测下限为7.1×102拷贝/μL,且与其他禽源病毒无交叉反应,批内和批间重复性试验变异系数均不超过2％,具有良好的特异性和重复性.将建立的检测方法应用于检测FAdV4在鸡肝癌细胞(Leghorn male hepatocellular cells,LMH)上的增殖特性,并与TCID50法测定的病毒滴度进行比较,结果显示,2种检测方法具有良好的相关性.综上,本研究建立的检测方法可用于FAdV4的临床早期快速检测.
文献关键词：
禽腺病毒血清4型;Hexon基因;荧光定量PCR;检测
中图分类号：
作者姓名：
卢清侠;金前跃;冯丽丽;柴永笑;郭振华;邢广旭;张改平
作者机构：
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州450002;江苏高校动物重要疾病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;河南省农业科学院农业经济与信息研究所,河南郑州450002;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100
文献出处：
引用格式：
[1]卢清侠;金前跃;冯丽丽;柴永笑;郭振华;邢广旭;张改平-.禽腺病毒血清4型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立与应用)[J].河南农业科学,2022(12):131-138
A类：
Leghorn
B类：
禽腺病毒,毒血,SYBR,Green,建立与应用,Fowl,adenovirus,serotype,FAdV4,临床检测,GenBank,Hexon,基因序列,序列设计,扩增引物,pEASY,Blunt,重组质粒,荧光定量检测,扩增产物,bp,检测下限,拷贝,交叉反应,重复性试验,鸡肝,肝癌细胞,male,hepatocellular,cells,LMH,增殖特性,TCID50,病毒滴度,快速检测
AB值：
0.413928
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