典型文献
一步法RT-LAMP-HNB检测兰花建兰花叶病毒和齿舌兰环斑病毒方法的建立
文献摘要：
[目的]全世界兰花病毒有50余种,建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)和齿舌兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)是其中最常见的两种病毒.目前仍没有有效的措施能够控制病毒病,因此建立针对病毒的高效监测、检测方法,对控制兰花病毒感染具有至关重要的意义.[方法]以兰花病毒CymMV和ORSV为试验材料,采用反转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP)进行病毒RNA的扩增,从而建立CymMV和ORSV的快速检测方法.分别根据两种病毒的cp基因序列保守区设计RT-LAMP引物,在一步法RT-LAMP反应体系中加入羟基萘酚蓝(HNB,终浓度200μmol/L)作为扩增产物指示剂,不需开盖进行凝胶电泳检测,便可直接根据体系颜色变化判读反应结果.[结果]利用该检测方法能够在2 h测出样品中是否存在CymMV和ORSV病毒RNA,其灵敏度是RT-PCR的10倍.对20株田间样品进行一步法RT-LAMP-HNB检测,根据田间检测结果显示,CymMV检出率为70％,ORSV检出率为55％,与RT-PCR结果保持一致,该法适用于田间样品检测.[结论]建立的一步法RT-LAMP-HNB是一种灵敏、快速、特异、便捷的CymMV和ORSV检测方法,仅需要简单控温设备如水浴锅便可进行核酸扩增,适用于在基层或不便利地区推广使用.
文献关键词：
建兰花叶病毒;齿舌兰环斑病毒;反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP);羟基萘酚蓝(HNB);cp基因
中图分类号：
作者姓名：
徐匆;黄皓;罗华建;杜见南;黄晓彦;陈彦;梁卫驱;胡珊
作者机构：
东莞市农业科学研究中心,广东 东莞 523086
文献出处：
引用格式：
[1]徐匆;黄皓;罗华建;杜见南;黄晓彦;陈彦;梁卫驱;胡珊-.一步法RT-LAMP-HNB检测兰花建兰花叶病毒和齿舌兰环斑病毒方法的建立)[J].广东农业科学,2022(05):95-101
A类：
齿舌兰环斑病毒,Odontoglossum
B类：
一步法,LAMP,HNB,建兰花叶病毒,余种,Cymbidium,mosaic,virus,CymMV,ringspot,ORSV,病毒病,环介导等温扩增,增方,快速检测方法,cp,基因序列,引物,反应体系,基萘,萘酚,扩增产物,指示剂,凝胶电泳,颜色变化,判读,田间检测,保持一致,于田,样品检测,控温,水浴锅,核酸扩增
AB值：
0.225145
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