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基于LAMP技术的弧菌快速检测方法的建立
文献摘要：
研究基于弧菌属16S rRNA保守基因片段设计引物,利用恒温条件进行扩增,建立并优化了弧菌属环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,在LAMP检测方法最优条件下,验证LAMP方法的特异性、灵敏度和实际应用性.结果表明:最佳反应条件为反应温度61℃、Mg2+、dNTPs和甜菜碱的浓度分别为4 mmol/L、1.8 mmol/L和0.4 mol/L;在最佳检测条件下,以4种弧菌(溶藻弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌)和8种其他菌株作为验证模板,发现该方法仅对弧菌有阳性扩增结果,证明该方法具有较高的特异性;同时,该方法对创伤弧菌DNA的最小检出量为940 fg/μL,其检测下限比常规PCR法降低了2个数量级.该研究成功建立了弧菌属细菌的快速检测方法,且方法具有良好的特异度和敏感度,为弧菌的快速检验提供了技术支撑.
文献关键词：
环介导等温扩增技术;弧菌;快速检测;方法建立
中图分类号：
作者姓名：
张芳芳
作者机构：
福建省闽东水产研究所,福建 宁德 352100
文献出处：
引用格式：
[1]张芳芳-.基于LAMP技术的弧菌快速检测方法的建立)[J].湖南农业科学,2022(04):1-5
A类：
B类：
LAMP,快速检测方法,16S,rRNA,保守基因,引物,恒温,Loop,mediated,isothermal,amplification,最优条件,反应条件,反应温度,Mg2+,dNTPs,甜菜碱,检测条件,溶藻弧菌,哈维氏弧菌,副溶血弧菌,创伤弧菌,对弧,扩增结果,fg,检测下限,数量级,快速检验,环介导等温扩增技术
AB值：
0.37802
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