典型文献
蜜蜂残翅病毒两步法荧光定量PCR检测方法的建立
文献摘要：
为了建立一种灵敏度更高的蜜蜂残翅病毒两步法荧光定量PCR检测方法,根据残翅病毒保守基因片段设计引物,采取反转录过程与荧光定量PCR过程分步进行的方式,建立基于SYBR染料法检测残翅病毒的两步法实时荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性、稳定性和可行性进行验证.结果显示,建立的两步法荧光定量PCR检测方法采用的引物特异性良好,在6.58×101～6.58×108拷贝/μL质粒标准品间具有良好线性关系,R2为0.999 7,扩增效率为100.8％.该方法的灵敏度为6.58拷贝/μL,与蜜蜂黑蜂王台病毒和以色列急性麻痹病毒不发生交叉反应,组内变异系数为0.20％～0.66％,组间变异系数为0.08％～0.98％,对蜜蜂样品残翅病毒的阳性检出率明显高于普通PCR,具有良好的特异性、重复性和实用性.综上,成功建立了一种灵敏度高、适用性好的残翅病毒两步法实时荧光定量PCR检测方法,为我国蜜蜂残翅病的流行病学调查、疫情监测和预警机制的构建提供新的技术支持.
文献关键词：
西方蜜蜂;东方蜜蜂;残翅病毒;两步法荧光定量PCR;SYBR染料法;灵敏度
中图分类号：
作者姓名：
王红坤;王艺桦;周丹银;董坤;张炫
作者机构：
云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201
文献出处：
引用格式：
[1]王红坤;王艺桦;周丹银;董坤;张炫-.蜜蜂残翅病毒两步法荧光定量PCR检测方法的建立)[J].河南农业科学,2022(03):154-161
A类：
残翅病毒,黑蜂王台病毒
B类：
两步法,保守基因,引物,取反,录过,分步,SYBR,染料法,灵敏性,拷贝,质粒,标准品,以色列,麻痹,痹病,交叉反应,组内变异,组间变异,阳性检出率,灵敏度高,流行病学调查,疫情监测,预警机制,西方蜜蜂,东方蜜蜂
AB值：
0.243786
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