目的 探讨miR-30a-5p通过调控组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激的影响及作用机制.方法 本研究通过体外培养心肌细胞H9 c2,建立缺氧复氧损伤细胞模型,细胞分组为:Control组、H/R组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-30a-5p组、H/R+si-NC组、H/R+si-HDAC9组、H/R+miR-30a-5p+pcDNA组、H/R+miR-30a-5p+HDAC9组.qRT-PCR检测miR-30a-5p和HDAC9 mRNA表达;Western blot检测HDAC9、Bax和Bcl-2蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)含量;双荧光素酶报告基因检测miR-30a-5p和HDAC9靶向关系.结果 与Control组比较,H/R组的心肌细胞中miR-30a-5p表达、Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH含量HDAC9 mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-30a-5p组的心肌细胞中miR-30a-5p表达、Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-30a-5p组中HDAC93'UTR-wt荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而HDAC93'UTR-mut荧光素酶活性没有任何变化.与anti-miR-N组比较,anti-miR-30a-5p组中miR-30a-5p表达显著降低(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-30a-5p组中HDAC9蛋白表达显著降低(P<0.05);与anti-miR-N组比较,anti-miR-30a-5p组中HDAC9蛋白表达显著增加(P<0.05).与Control组比较,H/R组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著增加(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05);与H/R+si-NC组比较,H/R+si-HDAC9组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05).与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-30a-5p组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05);与H/R+miR-30a-5p+pcDNA组比较,H/R+miR-30a-5p+HDAC9组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著增加(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05).结论 miR-30a-5p通过下调HDAC9减缓缺氧复氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡和氧化应激损,起到保护心肌细胞的作用.

miR-30a-5p;HDAC9;心肌细胞;凋亡;氧化应激

余敏;崔跃;黎鹏飞;谢丹;陈芬

430015 湖北省武汉市红十字会医院心血管内科;华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科

河北医药

[1]余敏;崔跃;黎鹏飞;谢丹;陈芬-.miR-30a-5p调控HDAC9对心肌细胞氧化应激损伤保护作用的机制研究)[J].河北医药,2022(08):1125-1129,1135

5p+HDAC9,HDAC93

30a,氧化应激损伤,损伤保护,组蛋白去乙酰化酶,氧诱导,心肌细胞凋亡,影响及作用,体外培养,养心,缺氧复氧损伤,细胞模型,Control,R+miR,NC,R+si,5p+pcDNA,qRT,blot,Bax,Bcl,流式细胞术,乳酸脱氢酶,LDH,双荧光素酶报告基因,基因检测,细胞凋亡率,蛋白表达水平,UTR,wt,荧光素酶活性,mut,anti,H9c2

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