为了解黑龙江省犬细小病毒(CPV)的流行情况,本研究从黑龙江省哈尔滨市、双城市、鹤岗市和大庆市的宠物医院共收集了 10份经胶体金拭子检测为CPV阳性的犬粪便样品,利用F81细胞进行病毒的分离,并对分离的病毒进行PCR、血凝性试验、病毒分型鉴定和VP2基因的遗传进化分析.结果显示,有8份处理后的病料样品接种猫肾细胞F81细胞后出现明显的CPE,其中有3株病毒的血凝(HA)效价可达1∶512;经PCR鉴定结果表明分离出8株CPV,分别命名为CPV-CX-1(简写为CX-1)～CX-3、CX-5～CX-8、CX-10;病毒的分型鉴定结果显示,8个分离株中有1株为CPV-2b型、3株为CPV-2c型、4株为CPV-2a型;VP2基因的遗传进化分析结果显示,8株CPV分属于两大不同的分支,其中CX-2、CX-3株与CX-8株处于一大分支,亲缘关系较近,CX-1、CX-7株与CX-5、CX-6、CX-10株处于另一大分支,亲缘关系也较近.其中仅CX-8株与国内外分离株的亲缘关系相对较近,CX-1、CX-5、CX-6、CX-7、CX-10株均与CPV参考株亲缘关系较远.选取HA效价较高的4株CPV感染杂交幼犬进行动物回归试验,每天观察各犬的临床症状、测量体温并于攻毒后第7 d采肛门拭子,根据发病犬临床症状的严重程度确定迫杀各组犬的时间,并分别经PCR检测CPV在各组犬各脏器中的分布及粪便的排毒情况;根据动物回归试验结果,选取2株致病力较强的CX-3株和CX-5株感染犬的十二指肠和空肠组织病料样品,再次接种杂交幼犬,按照动物回归试验方法进行强毒鉴定试验.动物回归试验结果显示,4株CPV感染幼犬后,CX-3株和CX-5株感染的幼犬出现犬细小病毒病发病症状,且CPV在感染犬的心、肝脏、脾脏、肺脏、肠淋巴、十二指肠和空肠均能够复制且有通过粪便排毒的现象;强毒鉴定结果显示,接种CX-3、CX-5株的感染犬出现典型的CPV感染症状,表明这2株CPV为强毒.本研究为监测黑龙江地区CPV的遗传变异趋势及其疫苗的研制具有重要意义.

犬细小病毒;分离鉴定;遗传进化分析

高艳;张峣;都兴洋;蒋烈戈;涂亚斌;张兴山;韩雪;高宏雷

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江 哈尔滨 150069;哈尔滨维科生物技术有限公司,黑龙江 哈尔滨 150069;广东省黄埔海关技术中心,广东 东莞 523000;新疆兵团第九师畜牧科学研究所,新疆 额敏 834601;哈尔滨市宠兴动物医院,黑龙江 哈尔滨 150001

中国预防兽医学报

[1]高艳;张峣;都兴洋;蒋烈戈;涂亚斌;张兴山;韩雪;高宏雷-.犬细小病毒黑龙江流行株的分离鉴定及其VP2基因的遗传进化分析)[J].中国预防兽医学报,2022(02):146-151

双城市

犬细小病毒,江流,分离鉴定,VP2,遗传进化分析,黑龙江省,CPV,流行情况,哈尔滨市,鹤岗市,大庆市,宠物医院,共收,胶体金,犬粪,粪便样品,F81,血凝,病毒分型,分型鉴定,肾细胞,CPE,HA,效价,CX,简写,分离株,2b,2c,2a,分属,亲缘关系,外分,较远,幼犬,动物回归试验,测量体温,攻毒,肛门,病犬,脏器,排毒,毒情,致病力,十二指肠,空肠,鉴定试验,细小病毒病,发病症状,脾脏,肺脏,感染症状,黑龙江地区,遗传变异

0.242514