典型文献
淀粉样融合蔗糖异构酶活性包涵体的异源表达及酶学性质表征
文献摘要：
为同步实现蔗糖异构酶(SIase)的异源表达和无载体固定化,采用融合表达制备出淀粉样融合蔗糖异构酶活性包涵体,并进行酶学性质分析.将SIase与酵母Ure2蛋白的N端淀粉样聚集片段(Ure2N)通过连接肽linker进行融合,构建表达载体pET 28a-Ure2N-linker-SIase,并在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达.融合蛋白Ure2N-linker-SIase主要以包涵体形式表达,采用TLC和HPLC检测产物,表明是一种活性包涵体,能催化蔗糖转化产生异麦芽酮糖.对该活性包涵体进行了酶学性质分析,结果表明,Ure2N-linker-SIase活性包涵体在35～45℃、pH 5.0～6.5具有较高的相对酶活力,在35℃和pH 6.0具有最高酶活力,动力学常数Km为(105.4±23.4)mmol/L,kcat/Km为(3.1±0.4)L/(mmol·min).该活性包涵体有利于简化分离纯化步骤和促进蔗糖异构酶的重复利用,降低异麦芽酮糖的生产成本.
文献关键词：
蔗糖异构酶;活性包涵体;异源表达;酶学性质
中图分类号：
作者姓名：
高向红;王从纲;庞焦;李宪臻
作者机构：
大连工业大学 生物工程学院,辽宁 大连 116034
文献出处：
引用格式：
[1]高向红;王从纲;庞焦;李宪臻-.淀粉样融合蔗糖异构酶活性包涵体的异源表达及酶学性质表征)[J].大连工业大学学报,2022(03):167-172
A类：
活性包涵体,Ure2,淀粉样聚集,Ure2N
B类：
蔗糖异构酶,异源表达,性质表征,SIase,无载体固定化,融合表达,表达制备,酶学性质分析,酵母,linker,建表,表达载体,pET,28a,大肠杆菌,BL21,DE3,融合蛋白,TLC,HPLC,测产,蔗糖转化,异麦芽酮糖,酶活力,动力学常数,Km,kcat,分离纯化,化步骤,重复利用
AB值：
0.228992
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