典型文献
TRMT61A在肝癌细胞中的功能及其机制研究
文献摘要：
目的·探究N1-甲基腺苷(N1-methyladenosine,m1A)甲基转移酶催化亚基(tRNA methyltransferase 61 Homolog A,TRMT61A)对肝癌细胞功能的影响及其潜在机制.方法·通过生物信息学软件分析TCGA数据库中TRMT61A在肝细胞肝癌患者样本中的表达情况并绘制相关生存曲线.通过CRISPR-Cas9技术构建稳定敲低TRMT61A表达的肝癌细胞系Huh7细胞和HepG2细胞,通过蛋白质印记法(Western blotting)检测对照组和敲低组细胞TRMT61A蛋白水平;通过斑点印迹实验检测2组细胞总RNA的m1A修饰水平.利用CCK-8法和平板克隆形成实验检测2组细胞增殖能力.使用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色和流式细胞术检测细胞周期;通过Western blotting检测细胞周期相关蛋白表达水平.使用Annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;通过Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达水平.结果·经生物信息学软件分析,TCGA数据库中TRMT61A在肝癌患者癌组织中高表达,通过绘制生存曲线发现TRMT61A与肝癌患者的预后呈负相关.在肝癌细胞系Huh7和HepG2中稳定敲低TRMT61A后,细胞中TRMT61A蛋白水平下降,总RNA的m1A修饰水平下降.CCK-8实验结果显示在Huh7和HepG2细胞中稳定敲低TRMT61A后细胞增殖明显受到抑制;平板克隆实验结果显示在Huh7和HepG2细胞中稳定敲低TRMT61A后,克隆形成数目显著降低.TRMT61A敲低的Huh7和HepG2细胞出现G0/G1期细胞周期阻滞,细胞中P21蛋白水平显著上升,cyclin D1蛋白水平下降.此外,细胞凋亡检测结果显示敲低TRMT61A后Huh7和HepG2细胞凋亡率上升,而细胞剪切活化caspase3蛋白水平也明显上升.结论·敲低TRMT61A可抑制肝癌细胞增殖,并诱导其发生凋亡.
文献关键词：
N1-甲基腺苷甲基化修饰;TRMT61A;肝细胞肝癌;细胞增殖;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
胡哲轩;张欣;沃璐璐;李静池;王娇;周佽想;赵倩
作者机构：
上海交通大学医学院病理生理学系,细胞分化与凋亡教育部重点实验室,上海200025;中国医学科学院应激与肿瘤创新单元(2019RU043),上海 200025
文献出处：
引用格式：
[1]胡哲轩;张欣;沃璐璐;李静池;王娇;周佽想;赵倩-.TRMT61A在肝癌细胞中的功能及其机制研究)[J].上海交通大学学报（医学版）,2022(06):742-750
A类：
TRMT61A,Homolog
B类：
肝癌细胞,N1,腺苷,methyladenosine,m1A,甲基转移酶,酶催化,催化亚基,tRNA,methyltransferase,细胞功能,潜在机制,生物信息学软件,TCGA,肝细胞肝癌,肝癌患者,生存曲线,CRISPR,Cas9,技术构建,敲低,细胞系,Huh7,HepG2,蛋白质印,印记,记法,blotting,斑点印迹,实验检测,CCK,克隆形成,细胞增殖能力,碘化丙啶,propidium,iodide,流式细胞术,蛋白表达水平,Annexin,细胞凋亡检测,检测试剂盒,凋亡相关蛋白,癌组织,平板克隆实验,G0,G1,细胞周期阻滞,P21,cyclin,D1,细胞凋亡率,caspase3,可抑制,甲基化修饰
AB值：
0.251352
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