目的 建立高环多环芳烃的代表性化合物苯并[k]荧蒽(BkF)致小鼠精母细胞(GC-2spd)损伤模型,初步探讨BkF引起GC-2细胞的损伤效应及机制.方法 通过比较毒理基因组学数据库(Comparative Toxicogenomics Database,CTD)筛选与BkF相关的男性生殖系统疾病的基因,对其进行功能和通路富集,探索可能的通路机制.以终浓度为0、10、20、40、80 μmol/L BkF处理GC-2细胞,检测细胞周期、氧化应激水平及DNA损伤效应,采用Western blot检测关键基因及相关通路核心分子的蛋白表达水平.结果 CTD数据库中筛选出与BkF相关生殖系统疾病的关键基因为CYP1A1和CYP17A1.GO富集分析发现其在男性生殖系统、细胞周期阻滞、氧化应激等生物过程中明显富集,KEGG富集分析发现其在细胞色素P450通路中富集明显(P＜0.01).BkF染毒GC-2细胞72 h后,细胞增殖活力较对照组明显下降,且存在剂量-效应关系.染毒剂量高于40 μmol/L后细胞周期阻滞明显(P＜0.05),且染毒组细胞内ROS水平(P＜0.05)、DNA损伤标志物γ-H2AX蛋白表达量(P＜0.01)呈剂量依赖性增加.与对照组相比,染毒组细胞CYP1A1和CYP17A1的蛋白表达显著增加(P＜0.05).加入AhR抑制剂CH223191后,染毒组CYP1A1和CYP17A1的表达明显下调(P＜0.05).结论 BkF通过诱导AhR受体激活,引起下游基因CYP1A1和CYP17A1的表达升高、细胞内ROS增加,从而导致GC-2细胞氧化应激,造成遗传损伤.

苯并[k]荧蒽;GC-2spd细胞;氧化损伤;AhR-CYP1A1信号通路;生信分析

王丹丹;王芙蓉;杨晓燕;周妮娅;杨惠芳;曹佳

750000银川,宁夏医科大学公共卫生与管理学院卫生毒理学教研室;400038重庆,陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系毒理学研究所;400021重庆,重庆市妇幼保健院

陆军军医大学学报

[1]王丹丹;王芙蓉;杨晓燕;周妮娅;杨惠芳;曹佳-.苯并[k]荧蒽(BkF)致雄性生殖细胞损害的初步研究)[J].陆军军医大学学报,2022(08):740-748

2spd

荧蒽,BkF,雄性生殖,生殖细胞,多环芳烃,小鼠精母细胞,损伤模型,损伤效应,毒理基因组学,基因组学数据库,Comparative,Toxicogenomics,Database,CTD,男性生殖系统,生殖系统疾病,通路富集,氧化应激水平,blot,关键基因,相关通路,蛋白表达水平,CYP1A1,CYP17A1,富集分析,细胞周期阻滞,生物过程,显富,细胞色素,P450,中富,染毒,细胞增殖活力,毒剂,ROS,H2AX,剂量依赖,量依赖性,AhR,CH223191,遗传损伤,氧化损伤,生信分析

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