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RACK1与CLIC1的相互作用鉴定
文献摘要：
目的 探究胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)与活化蛋白激酶C受体1(RACK1)在细胞内的相互作用.方法 构建重组质粒pcDNA3.1-RACK1-HA,转染质粒pcDNA3.1-RACK1-HA和(或)pcDNA3.1-CLIC1-FLAG到HEK 293T细胞中,转染pcDNA3.1-RACK1-HA和(或)pcDNA3.1-CLIC1-FLAG到COS7中.GST-pulldown和免疫共沉淀实验确定CLIC1和RACK1在体内及体外的相互作用.间接免疫荧光实验检测RACK1与CLIC1在细胞中的定位.结果 成功构建pcDNA3.1-RACK1-HA,Western blot检测结果证明了RACK1和CLIC1可在HEK 293T细胞中表达,GST-pulldown结果显示RACK1与CLIC1在体外可直接结合,免疫共沉淀结果显示RACK1和CLIC1可在细胞内结合.间接免疫荧光实验表明RACK1与CLIC1可共定位于细胞质.结论 RACK1与CLIC1可在细胞中结合.
文献关键词：
RACK1;CLIC1;相互作用
中图分类号：
作者姓名：
李彩红;朱亮亮;王蓓华;周恒;李强;朱昉修;范礼斌
作者机构：
安徽医科大学生命科学学院生物系,合肥 230032
文献出处：
引用格式：
[1]李彩红;朱亮亮;王蓓华;周恒;李强;朱昉修;范礼斌-.RACK1与CLIC1的相互作用鉴定)[J].安徽医科大学学报,2022(10):1518-1522
A类：
CLIC1
B类：
RACK1,氯离子通道蛋白,蛋白激酶,重组质粒,pcDNA3,HA,转染,FLAG,HEK,293T,COS7,GST,pulldown,免疫共沉淀,间接免疫荧光,实验检测,blot,共定位,细胞质
AB值：
0.196777
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