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自噬受体蛋白p62的表达及功能研究
文献摘要：
目的:构建人自噬受体蛋白p62的真核表达质粒,初步探索p62在氧化应激中的功能.方法:从HeLa细胞系中扩增SQSTM1基因,插入真核表达载体nFLAG/pRK5,构建p62的重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5.采用HEK293T细胞表达带有FLAG标签的重组p62蛋白,免疫共沉淀法观察p62和核因子E2相关因子2(Nrf2)相互作用.结果:重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5经琼脂糖凝胶电泳和测序对比均与预期结果一致,Western blot实验中p62蛋白可正常表达,且大小与预期结果一致.免疫共沉淀和蛋白质谱证明p62与氧化应激转录调控蛋白Nrf2可相互作用.结论:采用真核表达系统成功表达p62蛋白,并发现其与Nrf2可相互作用,为进一步研究p62与Keap1-Nrf2通路关系提供依据.
文献关键词：
SQSTM1基因;p62蛋白;自噬;真核表达;Nrf2蛋白
中图分类号：
作者姓名：
王娇;张莉;李颖;王慧;王湛;刘宏图
作者机构：
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206
文献出处：
引用格式：
[1]王娇;张莉;李颖;王慧;王湛;刘宏图-.自噬受体蛋白p62的表达及功能研究)[J].中国免疫学杂志,2022(06):715-719
A类：
nFLAG,pRK5
B类：
自噬受体,受体蛋白,p62,功能研究,真核表达质粒,初步探索,HeLa,细胞系,SQSTM1,真核表达载体,重组表达,HEK293T,免疫共沉淀,共沉淀法,核因子,E2,相关因子,Nrf2,琼脂糖凝胶电泳,预期结果,blot,转录调控,调控蛋白,表达系统,Keap1
AB值：
0.252821
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