典型文献
miR-146a调控脂肪间充质干细胞成骨分化的机制
文献摘要:
背景:既往研究表明,miR-146a能影响骨髓间充质干细胞成骨分化,但其在脂肪间充质干细胞成骨分化中的调节功能尚未阐明.目的:探究miR-146a对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的调控作用.方法:获取雄性C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞学方法检测第3代细胞CD29、CD44、CD45的表达,然后用miR-NC、miR-146a mimics和miR-146a inhibitor转染脂肪间充质干细胞并进行成骨诱导分化,成骨诱导第6天,采用碱性磷酸酶染色观察钙化程度,RT-PCR和Western blot检测成骨表型标志物的表达;成骨诱导第12天,采用茜素红染色鉴定细胞表面矿化基质的产生.结果 与结论:①培养的细胞为长梭形,呈成纤维样生长,第3代细胞CD29、CD44高表达,CD45低表达;②随着成骨诱导时间的延长,小鼠脂肪间充质干细胞miR-146a的表达逐渐降低(P<0.05);③与miR-NC组相比,碱性磷酸酶显色及其活性在miR-146a mimic组显著减弱,而在miR-146a inhibitor组显著增强(P<0.05);④与miR-NC组相比,ALP、Runx2、Akt、PI3K的mRNA和蛋白表达及p-Akt与p-PI3K的蛋白表达在miR-146a mimic组显著降低,而在miR-146a inhibitor组显著升高(P<0.05);⑤与miR-NC组相比,茜素红染色发现miR-146a mimic组细胞的钙化程度显著降低(P<0.05),而miR-146a inhibitor组的钙化程度显著升高(P<0.05);⑥上述结果表明,miR-146a能够通过PI3K/AKT信号通路负向调控脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化.
文献关键词:
干细胞;脂肪间充质干细胞;成骨细胞;miR-146a;成骨分化;信号通路
中图分类号:
作者姓名:
黄涛;程志坚;贾志强;赵晓光;王磊;翟文静;周永新
作者机构:
西安医学院第一附属医院,陕西省西安市 710077;西安交通大学第二附属医院,陕西省西安市 710061;河南科技大学第二附属医院,河南省洛阳市 471000
文献出处:
引用格式:
[1]黄涛;程志坚;贾志强;赵晓光;王磊;翟文静;周永新-.miR-146a调控脂肪间充质干细胞成骨分化的机制)[J].中国组织工程研究,2022(01):70-75
A类:
碱性磷酸酶显色
B类:
miR,146a,脂肪间充质干细胞,成骨分化,骨髓间充质干细胞,调节功能,C57BL,倒置,细胞形态,流式细胞学,CD29,CD44,CD45,NC,mimics,inhibitor,转染,成骨诱导分化,钙化,blot,茜素红,细胞表面,矿化,低表达,诱导时间,ALP,Runx2,Akt,PI3K,AKT,成骨细胞分化
AB值:
0.169224
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