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miR-124-3p经Wnt通路因子Axin1调控骨髓间充质干细胞的研究
文献摘要：
目的 探讨miR-124-3p经Wnt通路因子A(Axin1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分子靶向机制及调节BMSCs的成骨分化进而参与绝经后骨质疏松(PMOP)的形成.方法 收集20例股骨骨折需要手术并扩髓或暴露髓腔的患者,10例绝经后骨质疏松妇女(PMOP组)和10例非骨质疏松的绝经后妇女(对照组),术中取骨髓组织3～5 mL,建立体外BMSCs细胞模型,用流式细胞仪检测BMSCs标志物,将BMSCs诱导分化为成骨细胞,RT-qPCR法检测miR-124-3p的表达.双荧光素酶报告基因系统检测miR-124-3p结合位点A-Axin1.构建miR-124-3p过表达载体,miR-124-3p过表达转染PMOP-BMSCs同时更换成骨诱导培养基进行成骨诱导培养.诱导第7、14、21天分别收集细胞进行检测碱性磷酸酯酶染色(ALP)和茜素红染色.成骨诱导第7天,RT-qPCR检测各组BMSCs中Runx2、Osterix靶因子Axin1的表达.Western Blotting检测miR-124-3p转染BMSCs后的表达与Axin1关系.结果 ①RT-qPCR法检测miR-124-3p的表达,PMOP组低于对照组.②miR-124-3p过表达转染、成骨诱导,随着诱导时间的延长,细胞培养液中ALP水平逐渐上升,茜素红染色可见结节沉积逐增加.③RT-qPCR检测成骨诱导第7天,Runx2和Osterix的表达,BMSC+成骨分化液组明显高于BMSC组,BMSC+过表达miR-124-3p组较其对照组明显上升;Axin1的表达,BMSC+成骨分化液组明显低于BMSC组,BMSC+过表达miR-124-3p组较其对照组显降低.④荧光素酶报告基因实验证明了miR-124-3p与Axin1的可结合性.⑤Western Blotting检测BMSCs,miR-124-3p过表达组Axin1表达显著下降,而miR-124-3p抑制组Axin1表达显著升高.结论 miR-124-3p可通过Wnt通路靶点Axin1调节BMSCs的成骨分化进而参与PMOP的形成.
文献关键词：
绝经后骨质疏松;骨髓间充质干细胞;miR-124-3p;Axin1
中图分类号：
作者姓名：
王斌;麦彩园;曹燕明;胡晖;黄春梅;林烨澎;邓杏容;徐茂森;董俊球
作者机构：
佛山市三水区人民医院,广东 佛山528100;广东省妇幼保健院,广东 广州510010;广州医科大学附属第二医院,广东 广州510260
文献出处：
引用格式：
[1]王斌;麦彩园;曹燕明;胡晖;黄春梅;林烨澎;邓杏容;徐茂森;董俊球-.miR-124-3p经Wnt通路因子Axin1调控骨髓间充质干细胞的研究)[J].中国骨质疏松杂志,2022(03):313-319,372
A类：
BMSC+
B类：
miR,3p,Wnt,Axin1,骨髓间充质干细胞,BMSCs,分子靶向,成骨分化,绝经后骨质疏松,PMOP,股骨骨折,扩髓,露髓,髓腔,绝经后妇女,取骨,骨髓组织,细胞模型,流式细胞仪,诱导分化,成骨细胞,qPCR,双荧光素酶报告基因,系统检测,结合位点,过表达载体,转染,换成,成骨诱导,诱导培养基,天分,别收,磷酸酯,酯酶,ALP,茜素红,Runx2,Osterix,Blotting,诱导时间,细胞培养,培养液,荧光素酶报告基因实验,结合性,通路靶点
AB值：
0.208563
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