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典型文献
miR-199a调控IGF1表达对机械刺激下成骨细胞分化的影响
文献摘要:
目的:探讨微小RNA(miR)-199a在机械牵张力刺激下MC3T3-E1细胞中的表达变化及其对牵张力刺激MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制.方法:对体外培养的MC3T3-E1细胞加载12%牵张力0、3、6、12和24 h后,利用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测ALP活性,实时荧光定量PCR检测骨钙素(OCN)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA和miR-199a的表达.将MC3T3-E1细胞分为对照组、牵张力组、牵张力+miR-NC组和牵张力+miR-199a组,加载12%牵张力和转染miR-199a模拟物后,观察miR-199a和OCN、OSX、Runx2mRNA及蛋白表达以及ALP活性.茜素红S(ARS)染色观察钙结节形成能力.采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a与胰岛素样生长因子1(IGF1)的靶向关系,实时荧光定量PCR法和免疫印迹法检测miR-199a模拟物对IGF1 mRNA和蛋白表达的影响.采用SPSS 24.0软件包对数据进行统计学分析.结果:与O h时间点相比,以机械牵张力刺激3、6、12和24 h后,MC3T3-E1细胞ALP活性和OCN、OSX、Runx2 mRNA表达水平均显著升高,而miR-199a表达水平显著降低(P<0.05),12h时变化最为显著.与对照组相比,牵张力组细胞中miR-199a表达水平显著降低,而细胞ALP活性、OCN、OSX、Runx2 mRNA及蛋白表达水平、钙结节形成水平均显著升高(P<0.05);与牵张力组相比,牵张力+miR-NC组细胞中上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05);与牵张力+miR-NC组相比,牵张力+miR-199a组细胞中miR-199a表达水平显著升高,而细胞ALP活性、OCN、OSX、Runx2 mRNA及蛋白表达水平、钙结节形成水平均显著降低(P<0.05).miR-199a可与IGF1靶向结合,miR-199a模拟物可使MC3T3-E1细胞中IGF1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论:miR-199a可抑制机械牵张力刺激诱导的MC3T3-E1细胞成骨分化,其作用机制可能与靶向调控IGF1表达有关.
文献关键词:
成骨分化;机械刺激;微小RNA-199a;胰岛素样生长因子1
作者姓名:
林维龙;吴晓沛;王晓明;何薇薇
作者机构:
河北北方学院附属第一医院 口腔科,河北 张家口 075000;张家口学院,河北 张家口 075000;河北北方学院,河北 张家口 075000
文献出处:
引用格式:
[1]林维龙;吴晓沛;王晓明;何薇薇-.miR-199a调控IGF1表达对机械刺激下成骨细胞分化的影响)[J].上海口腔医学,2022(02):132-137
A类:
机械牵张力,Runx2mRNA
B类:
199a,IGF1,机械刺激,下成,成骨细胞分化,MC3T3,E1,表达变化,成骨分化,体外培养,碱性磷酸酶,ALP,活性检测,检测试剂盒,骨钙素,OCN,细胞特异性,Osterix,OSX,Runt,+miR,NC,转染,茜素红,ARS,形成能,双荧光素酶报告基因实验,实验检测,胰岛素样生长因子,免疫印迹法,软件包,统计学分析,12h,蛋白表达水平,可抑制,靶向调控
AB值:
0.138325
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