目的 观察长链非编码RNA(lncRNA)COL11A1-208在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中的表达和定位,及其对OSCC细胞增殖和侵袭的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测COL11A1-208在CAL27、HN4、HN6等OSCC细胞系中的表达情况;通过RNA核质分离和荧光原位杂交(FISH)实验检测COL11A1-208在OSCC细胞中的定位.采用CAL27、HN4细胞建立COL11A1-208敲减组(SS-COL11A1-208组)和敲减对照组(SS-NC组);采用HN4、HN6细胞建立COL11A1-208过表达组(LV-COL11A1-208组)和过表达对照组(LV-NC组).采用CCK-8实验、平板克隆形成实验以及Transwell实验检测COL11A1-208表达改变对各组细胞增殖活性、克隆形成能力、迁移和侵袭能力的影响.qPCR和Western blotting检测COL11A1-208表达改变对COL11A1基因及上皮-间充质转化相关蛋白(上皮钙黏素、波形蛋白)表达的影响.采用裸鼠皮下移植瘤模型观察COL11A1-208表达对OSCC细胞体内增殖能力的影响.结果 qPCR结果显示,COL11A1-208在7个OSCC细胞系的相对表达量均明显高于正常对照细胞(P<0.05).核质分离结果显示,CAL27、HN4、HN6细胞内COL11A1-208的胞核占比明显高于胞质占比(P<0.01);FISH实验结果显示,COL11A1-208主要定位于细胞核.与SS-NC组比较,SS-COL11A1-208组COL11A1-208相对表达量明显降低(CAL27:0.225±0.030 vs.1.000±0.000;HN4:0.393±0.028 vs.1.000±0.000;P<0.01);细胞增殖活性减弱(P<0.05),细胞克隆形成能力降低(P<0.0001),细胞穿膜数减少(P<0.05).与LV-NC组比较,LV-COL11A1-208组COL11A1-208相对表达量明显升高(HN6:6524.216±3395.926 vs.1.000±0.000;HN4:3486.230±743.908 vs.1.000±0.000;P<0.05),细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞克隆形成能力增高(P<0.01),细胞穿膜数增多(P<0.0001).SS-COL11A1-208组COL11A1蛋白相对表达量明显低于SS-NC组(P<0.05),而LV-COL11A1-208组则明显高于LV-NC组(P<0.01).另外,与相应对照组比较,SS-COL11A1-208组上皮钙黏素表达增高(P<0.05),波形蛋白表达降低(P<0.05);LV-COL11A1-208组上皮钙黏素表达降低(P<0.05),波形蛋白表达增高(P<0.01).裸鼠皮下移植瘤模型实验显示,与相应对照组比较,ASO-COL11A1-208组皮下移植瘤重量和体积均减小(P<0.05),LV-COL11A1-208组皮下移植瘤重量和体积均增大(P<0.05).结论 COL11A1-208可促进OSCC细胞的增殖和侵袭能力,在OSCC发生与进展中发挥重要作用.

口腔鳞状细胞癌;长链非编码RNA;COL11A1-208;增殖;侵袭

蒋英英;陈曦;石雨;应济丞;王笑笑;丁刚

潍坊医学院口腔医学院,山东潍坊 261053;潍坊医学院附属医院口腔科,山东潍坊 261035

解放军医学杂志

[1]蒋英英;陈曦;石雨;应济丞;王笑笑;丁刚-.长链非编码RNA COL11A1-208对口腔鳞癌细胞增殖及侵袭的影响)[J].解放军医学杂志,2022(09):851-862

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