目的:探讨白介素1受体相关激酶3(IRAK3)基因表达对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的作用及机制.方法:分离培养SD乳鼠原代心肌细胞,随机分为对照组、LPS组、siIRAK3组和siIRAK3+LPS组.siIRAK3组和siIRAK3+LPS组心肌细胞转染IRAK3沉默核糖核酸(siRNA),对照组和LPS组转染阴性对照siRNA.转染48 h后LPS组和siIRAK3+LPS组分别用LPS(10 μg/mL)处理心肌细胞6h,对照组和siIRAK3组加入等量的PBS溶液.采用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测LPS对心肌细胞IRAK3表达的影响,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测四组心肌细胞增殖,采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测四组心肌细胞凋亡.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测四组心肌细胞上清液中炎症因子白介素(IL)-6、肿瘤坏因子(TNF)-α的水平.Western blot检测核转录因子-κB(NF-κB)蛋白和NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)的表达.结果:Western bolt结果显示,LPS使原代心肌细胞IRAK3的蛋白表达升高(P＜0.05),CCK-8和TUNEL结果显示,与对照组相比,LPS组心肌细胞活力降低,心肌细胞凋亡比例升高(P＜0.05);siIRAK3组细胞活力和细胞凋亡比例与对照组相比均无明显差异(P＞0.05).与LPS组相比,siIRAK3+LPS组心肌细胞活力升高,心肌细胞凋亡比例降低(P＜0.05).与对照组相比,LPS组心肌细胞分泌的IL-6、TNF-α升高,NF-κB蛋白表达升高而IκB-α蛋白表达降低(P＜0.05).与LPS组相比,siIRAK3+LPS组心肌细胞炎症因子分泌减少,NF-κB蛋白表达降低,IκB-α蛋白表达升高(P＜0.05).结论:干扰IRAK3基因表达通过负向调控NF-κB通路减轻LPS诱导的大鼠原代心肌细胞损伤.

IRAK3;LPS;心肌细胞损伤;NF-κB通路

海南医学院第二附属医院心血管内科 海南海口 570100

[1]李伟;王龙涛;陈川斌;林朋;李小蕤-.基于NF-κB通路探讨IRAK3基因表达对脂多糖诱导的心肌细胞损伤的作用及机制)[J].现代生物医学进展,2022(22):4242-4246,4278

IRAK3,siIRAK3,siIRAK3+LPS

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