探讨槐耳上清(Huaier extract supernatant,HES)对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、自噬和体外迁移能力的影响及其分子作用机制.采用HPLC-MS对HES中的主要成分进行简单初步分析.通过MTT法、集落形成实验、EdU染色法探究HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖的影响.利用Hoechst染色法、流式细胞术明确HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞凋亡的影响.通过吖啶橙染色法和细胞划痕实验分别研究HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞自噬和体外迁移能力的影响.借助Western blot检测HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞中与凋亡、上皮-间质转化(epithelial-mesen-chymal transition,EMT)以及信号通路相关的蛋白表达水平的调控作用.结果显示,HES中主要含有一些极性较大的成分.HES能够明显降低人胃癌细胞的细胞活力,且具有浓度和时间依赖性,给药处理人胃癌HGC-27和MGC-803细胞48 h时,其半数抑制浓度(IC50)分别为7.56、10.77 g·L-1.同时,HES能够显著抑制人胃癌细胞的集落形成能力和短期增殖能力.8 g·L-1的HES作用于2种人胃癌细胞72 h,细胞凋亡率分别为62.13％±8.92％和54.50％±3.26％.HES还能够促进人胃癌细胞发生自噬,并削弱人胃癌细胞的体外迁移能力.此外,HES能够上调人胃癌细胞中凋亡标志物PARP的剪切水平和上皮细胞标志物E-cadherin的蛋白水平,并下调p-mTOR、p-S6和p-ERK的蛋白水平.因此,HES是槐耳发挥抗肿瘤作用的有效成分之一,其能够抑制人胃癌细胞的增殖和迁移,并诱导其发生凋亡和自噬,而且mTOR信号和ERK信号可能参与了HES的抗胃癌作用.该研究能够为槐耳的深入研究和临床应用提供新的参考,对进一步推动槐耳的科学开发利用具有重要意义.

槐耳上清(HES);胃癌;增殖;凋亡;mTOR;ERK

魏雪娇;刘亚鑫;黄惠铭;欧阳里山;谢锦欣;王龙燕;刘东晓;屠鹏飞;胡仲冬

北京中医药大学中药学院中药现代研究中心,北京 100029

中国中药杂志

[1]魏雪娇;刘亚鑫;黄惠铭;欧阳里山;谢锦欣;王龙燕;刘东晓;屠鹏飞;胡仲冬-.槐耳上清对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的抗肿瘤作用研究)[J].中国中药杂志,2022(23):6457-6465

Huaier

槐耳,上清,HGC,MGC,抗肿瘤作用,extract,supernatant,HES,外迁,迁移能力,分子作用机制,HPLC,初步分析,MTT,集落形成,EdU,染色法,Hoechst,流式细胞术,吖啶橙,细胞划痕实验,细胞自噬,blot,间质转化,epithelial,mesen,chymal,transition,EMT,蛋白表达水平,胃癌细胞,细胞活力,时间依赖性,半数抑制浓度,IC50,形成能,细胞凋亡率,调人,PARP,上皮细胞,cadherin,mTOR,S6,ERK,有效成分,细胞的增殖,增殖和迁移,凋亡和自噬,科学开发利用

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